WB、ELISA用 抗Homer1ウサギモノクローナル抗体 - Q86YM7

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：Homer1の機能と局在

• Homer1は、Homerファミリーに属するシナプス後肥厚足場タンパク質であり、HOMER1遺伝子（別名SYN47）によってコードされます。このタンパク質は、選択的スプライシングによって生成される複数のアイソフォーム（アイソフォーム1、2、3など）が存在し、それぞれ異なる機能的な役割を果たします。
• Homer1は、I群代謝型グルタミン酸受容体（GRM1、GRM5）と小胞体関連イノシトール1,4,5-三リン酸受容体（ITPR1）を結合・架橋し、細胞表面受容体の活性化を細胞内カルシウム放出に連結させます。
• Homer1はまた、AGAP2との相互作用を通じてGRM1をPI3キナーゼに連結し、SHANK1と高次複合体を形成します。これは、樹状突起スパインの構造的・機能的完全性にとって重要です。
• アイソフォーム1はGRM5の輸送と細胞表面発現を調節しますが、アイソフォーム3は天然の優性ネガティブとして機能し、持続的な神経可塑性と発達の過程におけるシナプス代謝型グルタミン酸機能を調節するためにアイソフォーム1と競合します。
• Homer1は、細胞質、シナプス後肥厚、シナプス、樹状突起スパインに局在し、シナプス組織化における役割と一致しています。
• カルシニューリンとNFATタンパク質結合を競合し、NFATの活性化を防ぐことにより、カルシニューリン-NFAT経路を阻害してT細胞活性化を負に調節します。 関連参考文献: PMID:18218901
• 翻訳後修飾には、プロテオミクス同定により示唆されるアセチル化とリン酸化が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトHomer1のアミノ酸101–220から構成され、抗体特異性にとって重要な機能ドメインを含む可能性のある中心領域です。同様の抗体を設計する際には、広い反応性を得るためにアイソフォーム間で保存されている領域、またはアイソフォーム選択的検出が必要な場合はアイソフォーム特異的配列を考慮してください。
• ウェスタンブロットでは、期待されるバンドは約40 kDa付近です。新鮮または適切に凍結された組織/細胞溶解物を使用し、Homer1がリン酸化タンパク質であるため、ホスファターゼ阻害剤を含めることを検討してください。
• ELISAアプリケーションは、サンプル中のHomer1を定量するために使用できます。適切なコーティング条件を確保し、組換えタンパク質標準品を用いて直線性を検証してください。
• Homer1のシナプス局在を考慮すると、神経サンプルにおける検出感度を高めるために、細胞内分画法またはシナプス後肥厚タンパク質の濃縮を行うと良いでしょう。

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