WB、IF-P、IHC-P、ELISA用抗Homer1ウサギモノクローナル抗体 - Q86YM7

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：Homer1の機能と局在

• Homer1は、HOMER1遺伝子にコードされるシナプス後肥厚部の足場タンパク質です。選択的スプライシングにより複数のアイソフォーム（例：アイソフォーム1および3）が産生され、アイソフォーム3はドミナントネガティブ制御因子として機能します。
• Homer1は、グループI代謝型グルタミン酸受容体（GRM1およびGRM5）と、ITPR1、SHANK1、SHANK3などの細胞内タンパク質に結合して架橋し、細胞表面受容体の活性化を小胞体からの細胞内カルシウム放出に連結します。
• アイソフォーム1はGRM5の輸送および細胞表面発現を制御する一方、アイソフォーム3はアイソフォーム1と動的に競合し、シナプス性代謝型グルタミン酸機能を微調整するとともに、長期にわたる神経可塑性および発生過程における構造変化に関与します。
• SHANK1との会合を介して、Homer1は樹状突起スパインの構造的および機能的完全性に重要な高次複合体を形成します（相同性による推定）。
• 神経系以外では、Homer1はカルシニューリン-NFAT経路を阻害することでT細胞の活性化を負に制御します。これは、カルシニューリンとNFATタンパク質の結合を競合し、NFATの脱リン酸化および活性化を阻止することによります。 関連文献： PMID:18218901
• 細胞内では、Homer1は主にニューロンの細胞質、シナプス後肥厚部、興奮性シナプス、および樹状突起スパインに局在します。
• このタンパク質は、アセチル化やリン酸化などの翻訳後修飾を受け、オリゴマー形成に重要なコイルドコイルドメインを含みます。

実験上の指針および技術的ヒント

• 免疫原はアミノ酸170～354をカバーしており、コイルドコイル配列またはリンカー配列を含む可能性があります。そのため、この抗体は同じエピトープを共有するすべてのHomer1アイソフォームを認識する可能性があります。
• ウェスタンブロットでは、還元条件を使用し、ヒトまたはラット脳ライセートなどの適切な陽性対照を用いてください。予想されるバンドサイズは約40 kDaですが、アイソフォームによって泳動度が異なる場合があります。
• 免疫蛍光および免疫組織化学では、固定および透過化プロトコルを最適化してください。また、パラフィン切片では、エピトープへのアクセス性を維持するため、適切な抗原賦活化条件を決定してください。
• Homer1A、Homer1B、Homer1Cを区別する必要がある場合は、siRNAノックダウンまたはアイソフォーム特異的コンストラクトにより、アイソフォーム特異性を検証することを検討してください。
• ELISAにおける抗体性能は、組換えHomer1タンパク質または細胞ライセートを用いて評価できます。非特異的結合を低減するため、ブロッキング液および洗浄バッファーの組成に注意してください。

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