ウエスタンブロット、IF/ICC、IHC-P、ELISA用 抗HSP70/HSPA1A ウサギポリクローナル抗体 - P0DMV8/P0DMV9

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：HSP70/HSPA1Aの機能と局在

• HSPA1A (Heat Shock 70 kDa Protein 1A) は、HSP70ファミリーの代表的なメンバーであり、正常時およびストレス条件下におけるタンパク質恒常性に不可欠な分子シャペロンです (UniProt)。
• ATP依存性シャペロンとして機能：ATP結合状態（基質親和性低）とADP結合状態（基質親和性高）の間を循環し、基質の結合と放出を促進します。Jドメイン共役シャペロン（HSP40s）はATPase活性を刺激し、ヌクレオチド交換因子（BAGファミリー）はADPの放出を促進します。 関連参考文献： PMID:24012426 PMID:24318877 PMID:26865365
• タンパク質トリアージを制御：そのアセチル化状態により、HOPXを介したリフォールディング促進か、STUB1/CHIPを介したユビキチン媒介分解促進のいずれかを決定し、プロテオーム品質管理のバランスを取ります。 関連参考文献： PMID:27708256
• 主に細胞質と核に局在しますが、有糸分裂期には中心体にも関連し、紡錘体極の完全性と双極紡錘体の形成に必要です。 関連参考文献： PMID:27137183
• 主要なシグナル伝達経路を調節：STUB1を介したSMAD3（TGF-βシグナル伝達を抑制）およびFOXP3（炎症時の制御性T細胞内）のユビキチン化と分解を促進します。 関連参考文献： PMID:24613385 PMID:23973223
• PRDM1/Blimp-1などの誤って折り畳まれた転写因子のクリアランスに参加し、それらを細胞質に保持し、プロテアソーム分解へと標的化します。 関連参考文献： PMID:28842558
• 熱ショック応答の回復期にHSF1の転写活性を負に調節し、ストレス応答の減衰に寄与します。 関連参考文献： PMID:9499401
• 細胞外に分泌されることがあり、特定の病理学的状況下では、ロタウイルスAの侵入のための宿主細胞受容体として機能します。(SWISS-PROT)

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトHSPA1Aのアミノ酸500-600内の配列に対応しており、この領域はヒト、マウス、ラット間で高度に保存されているため、広範な交差反応性が期待されますが、ユーザーは自身の特定のサンプルシステムでの性能を検証する必要があります。
• ウエスタンブロットでは、約70 kDaのバンドが観察されます。適切な陽性対照（例：熱ショック処理したHeLaライセート）と陰性対照を常に含め、正規化のためのハウスキーピングタンパク質の使用を検討してください。
• 免疫蛍光および免疫組織化学では、HSP70は細胞質区画と核区画の両方に存在する可能性があるため、固定と透過化の条件を最適化してください。ホルマリン固定パラフィン包埋切片では抗原賦活化が必要な場合があります。
• ELISAで使用する場合は、非特異的結合を最小限に抑えるために、コーティングバッファーとブロッキング条件がポリクローナル抗体と互換性があることを確認してください。
• この抗体は、ウエスタンブロット、免疫蛍光/免疫細胞化学、免疫組織化学（パラフィン）、およびELISAでの使用が報告されています。他の用途では、さらなる最適化が必要となる場合があります。

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