FC用 抗ヒトFcεR1α モノクローナル抗体 - P12319

中核製品仕様とパラメーター

生物学的背景：FcεR1αの機能と局在

• タンパク質の正体：高親和性免疫グロブリンε受容体αサブユニット（FcεR1α、Fc-epsilon RI-alphaとも呼ばれ、FCER1A遺伝子によりコードされる）。免疫グロブリン超ファミリーに属し、細胞外領域に2つのIg様ドメインを含む。
• 中核機能：免疫グロブリンE（IgE）の高親和性受容体として機能する。IgEの結合とそれに続く抗原/アレルゲンによる架橋は、骨髄系細胞の活性化と分化を駆動する細胞内シグナルカスケードを開始する。
• 細胞種：主に肥満細胞、好塩基球、好酸球に発現する。これらの細胞上で、脱顆粒と血管作動性アミン、脂質メディエーター、サイトカインの放出を引き起こし、炎症反応と組織リモデリングに寄与する。
• 宿主防御：蠕虫寄生虫、病原性細菌、毒液毒性に対する防御機構として、即時型過敏反応を仲介する。
• 病的役割：調節が乱れると、FcεR1αシグナル伝達は生命を脅かすアレルギー反応やアナフィラキシー反応を引き起こす可能性がある。
• 細胞内局在：主に細胞膜に存在し、1つの膜貫通ヘリックスを持つ。細胞外領域にはIgE結合部位が含まれ、細胞内尾部はシグナル伝達アダプターと結合する。
• 翻訳後修飾と構造的特徴：高度にグリコシル化されている；Igドメイン内に保存されたジスルフィド結合を含む。主要な構造的特徴には、シグナルペプチド（成熟過程で切断）、2つのIg様ドメイン、膜貫通ヘリックス、短い細胞質尾部が含まれる。
• 組織発現：アレルギー性エフェクター反応における役割と一致して、好酸球、ならびに肥満細胞および好塩基球に高く発現している。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用した免疫原は、ヒトFcεR1α（NP_001992.1）のアミノ酸26-205にまたがり、これはシグナルペプチド切断後の全細胞外ドメインに対応する。この設計は、生細胞上の受容体の天然構造を認識する抗体を有利にし、フローサイトメトリー応用に理想的である。
• この抗体はに直接標識されているため、二次染色ステップは不要である。これにより非特異的結合が減少し、多色パネルの設計が簡素化される。FcγR相互作用からのバックグラウンドを最小限に抑えるために、Fc受容体ブロッキング試剤による細胞の前インキュベーションを検討すること。
• 適切な細胞系（ヒト好酸球、好塩基球、またはin vitroで分化させた肥満細胞）で染色を検証すること。受容体は好酸球に中程度に発現しているが、IL‑5またはGM‑CSFによってアップレギュレーションされる可能性がある。
• 一般的なフローサイトメトリー対照には、未染色細胞、アイソタイプコントロール（標識ウサギIgG）、および脱顆粒を研究する場合の刺激誘導性活性化マーカーが含まれる。
• 表面エピトープを歪ませる固定/透過化プロトコルは避けること；細胞内染色を試みる場合は、抗体との適合性をテストすること。

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