フローサイトメトリー（細胞内）用抗ヒトガレクチン-3モノクローナル抗体 - P17931

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：ガレクチン-3の機能と局在

• LGALS3遺伝子にコードされるガレクチン-3は多機能タンパク質で、35 kDaレクチン、炭水化物結合タンパク質35（CBP35）、ガラクトシド結合タンパク質（GALBP）、IgE結合タンパク質、L-31、ラミニン結合タンパク質、レクチンL-29、Mac-2抗原といった別名でも知られています。
• ガラクトース特異的レクチンとしてIgEに結合し、インテグリンとの相互作用を媒介することで、胚発生における内皮細胞遊走および円柱上皮細胞分化に寄与します。
• 核内ではプレmRNAスプライシング因子として働き、細胞質では損傷した内膜の認識に関与し、TRIM16と共にATG16L1およびBECN1をリクルートすることでオートファジーを制御します。
• 好中球の活性化・接着、単球/マクロファージの走化性誘引、アポトーシス好中球のオプソニン化、肥満細胞の活性化など、急性炎症反応において重要な役割を担っています。
• 本タンパク質はシグナルペプチドを欠くにもかかわらず、非古典的経路を介して分泌され、細胞質、核、細胞外空間を往復しています。
• ガレクチン-3はアセチル化やリン酸化といった翻訳後修飾を受け、ジスルフィド結合を保有しており、これらがレクチン活性や安定性を調節している可能性があります。
• 主に結腸上皮、活性化マクロファージ、胎児膜で発現しており、免疫防御や組織リモデリングにおける重要性が示されています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体は全長ヒトガレクチン-3（アミノ酸1～250）を覆う組換えタンパク質を免疫原として作製されており、細胞質および核に存在する両方のプールのタンパク質を認識することが期待されます。
• 細胞内フローサイトメトリー（FC intra）では、透過処理および固定プロトコルを最適化し、様々な亜細胞区画に存在するガレクチン-3に抗体が到達できるようにしてください。
• ガレクチン-3は分泌される性質も持つため、表面または放出されたタンパク質を解析対象とする場合は、分泌阻害剤の使用や細胞外画分の解析を検討し、適切な対照を設定してください。
• 染色の特異性は、ガレクチン-3ノックアウトまたはノックダウン細胞株を用いて検証するか、抗体を免疫原と事前にインキュベートしてシグナルが減弱することを確認してください。
• ご使用の実験系に合わせて、抗体濃度およびインキュベート時間の滴定が必要な場合があります。最適なシグナル対ノイズ比を得るために、複数の希釈倍率で試験を行ってください。

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