WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗ヒトParkinポリクローナル抗体 - O60260

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：Parkinの機能と局在

• PRKN（PARK2）遺伝子にコードされるParkinは、複数タンパク質複合体内で機能するE3ユビキチンタンパク質リガーゼであり、基質タンパク質へのユビキチン部分の共有結合を触媒します。これにより、タンパク質分解、ミトコンドリア品質管理、細胞生存などの細胞プロセスを媒介します。 関連文献： PMID:10888878、PMID:10973942、PMID:11431533

• Parkinは、SYT11、VDAC1、BCL2、CCNE1、GPR37、RHOT1/MIRO1、MFN1、MFN2、SNCAIP、TOMM20、ZNF746など幅広い基質をユビキチン化します。また、細胞内環境に応じて、モノユビキチン化に加え、さまざまなポリユビキチン鎖結合（Lys-6、Lys-11、Lys-48、Lys-63）を媒介します。 関連文献： PMID:29311685、PMID:32047033、PMID:10888878、PMID:10973942、PMID:11431533、PMID:19229105、PMID:20889974、PMID:25474007

• Parkinの主要な機能はミトコンドリアの完全性を維持することです。ミトコンドリアが損傷すると、PINK1を介したリン酸化によりParkinがミトコンドリア外膜へリクルートされ、そこでタンパク質をユビキチン化してマイトファジーとミトコンドリア分裂を促進し、機能不全のオルガネラを除去します。 関連文献： PMID:11439185、PMID:18957282、PMID:19029340、PMID:24660806、PMID:24784582、PMID:25474007

• Parkinは、TOMM20、MFN1、MFN2、MIRO1、USP30などのミトコンドリア外膜タンパク質を直接ユビキチン化し、マイトファジーを誘導するとともに、損傷したミトコンドリアが健全なネットワークと融合するのを防ぎます。また、MIRO1の分解を介してミトコンドリアの運動性も制御します。 関連文献： PMID:19029340、PMID:19966284、PMID:21753002、PMID:22396657、PMID:23620051

• マイトファジー以外にも、ParkinはBCL2をモノユビキチン化してオートファジーを促進し、ミトコンドリアへのカルシウム流入を制限し、p53を転写レベルで抑制することにより、細胞をアポトーシスから保護します。また、腫瘍抑制因子として機能する可能性もあります。 関連文献： PMID:20889974、PMID:19801972、PMID:32047033、PMID:12719539、PMID:11439185

• PRKNのホモ接合性または複合ヘテロ接合性変異は、常染色体劣性若年性パーキンソン病（PDJ）の主な原因です。Parkinは脳、特に黒質で高く発現しており、PARK2患者の脳および多くの腫瘍ではその発現量が低下しています。 関連文献： PMID:9560156、PMID:12719539、PMID:14614460、PMID:19501131

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトParkinのN末端387アミノ酸をカバーしているため、この抗体は複数のエピトープを認識し、内在性Parkinだけでなく組換えタンパク質も検出できる可能性があります。
• ウエスタンブロットでは約52 kDaのバンドが予想されます。ただし、翻訳後修飾やアイソフォームにより微弱なバンドが現れる場合があるため、適切なコントロール（例：Parkinノックアウト溶解液）を含めることが推奨されます。
• マウスおよびラットとの交差反応性があるため、この抗体はパーキンソン病のげっ歯類モデルにおけるParkin研究に適している可能性があります。IHC-PまたはIF/ICCを用い、ミトコンドリアマーカーとの共染色を行って、使用する組織または細胞系で抗体を検証することを検討してください。
• 最適な希釈倍率および条件は、各アプリケーションについて経験的に決定する必要があります。ポリクローナル抗体では、初期希釈倍率としてWBで1:500～1:2000、IHC-Pで1:50～1:200、IF/ICCで1:50～1:200が一般的に使用されます。
• ELISAでは、適切な二次抗体と組み合わせることで、捕捉抗体または検出抗体として使用できます。性能は抗原の提示方法によって異なる場合があります。

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