WB、IHC-P、IF/ICC、IP、ELISA用 抗IGF2BP3 ポリクローナル抗体 - O00425

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景: IGF2BP3の機能と局在

• インスリン様成長因子2 mRNA結合タンパク質3 (IGF2BP3)は、IMP3またはKOCとも呼ばれ、VICKZファミリーに属するRNA結合タンパク質であり、ヒトではIGF2BP3遺伝子 (GeneID: 10643) によってコードされています。
• IGF2BP3はRNA結合因子として機能し、標的転写産物を細胞質メッセンジャーリボヌクレオタンパク質 (mRNP) 複合体にリクルートし、mRNAの輸送、一時的な貯蔵、エンドヌクレアーゼ攻撃やマイクロRNA媒介分解からの保護を可能にします。 関連参考文献: PMID:29476152
• N6-メチルアデノシン (m6A) 修飾されたmRNAに優先的に結合し、その安定性を高めます。例えば、3'-UTRに結合してCD44 mRNAを安定化させ（がん細胞の接着とインバドポディアを促進）、m6A依存的にコード領域不安定化決定因子 (CRD) に結合してMYC mRNAを安定化させます。 関連参考文献: PMID:29476152
• IGF2BP3はまた、インスリン様成長因子2 (IGF2) mRNAの5'-UTRにも結合し、成長因子の調節に関与していることが示唆されています。
• このタンパク質は、核、細胞質、P-body、ストレス顆粒に局在し、mRNAの運命決定における動的な役割を反映しています。
• 組織発現は、胎児肝臓、肺、腎臓、胸腺、胎盤、および様々ながん（子宮頸部腺癌、精巣癌、膵臓癌、腎細胞癌など）で顕著であり、胎児発生期に広く発現しています。
• 翻訳後修飾にはリン酸化とユビキチン結合（イソペプチド結合）が含まれており、その活性や安定性を調節している可能性があります。

実験ガイドと技術的ヒント

• 使用した免疫原は、標準的なRNA結合ドメインから遠位の領域（アミノ酸300–579）に対応しており、IPやIFアプリケーションにおける標的結合への干渉を最小限に抑える可能性があります。
• ウェスタンブロット (WB) では、予想される分子量は約64 kDaです。還元剤入りゲルと適切な分子量マーカーの使用を検討してください。
• IHC-Pでは、クエン酸塩またはEDTAバッファーを用いた熱誘起エピトープ修復 (HIER) による抗原賦活化を行うと検出感度が向上する可能性があります。関連するサンプルシステムで検証してください。
• IF/ICCでは、4%パラホルムアルデヒドによる固定と0.1%トリトンX-100による透過化が一般的な出発点です。核と細胞質の染色を評価する必要があります。
• 免疫沈降 (IP) では、抗体が内因性IGF2BP3複合体をプルダウンする能力を確認してください。タンパク質-タンパク質相互作用を保持するために、溶解バッファーの厳密性を最適化してください。
• ELISAの性能は、直接法またはサンドイッチ法で評価できます。ポリクローナル抗体として、適切なモノクローナル抗体と組み合わせることで、捕捉試薬と検出試薬の両方として機能する可能性があります。
• マウスおよびラットとの交差反応性に注意してください。これは保存されたエピトープを示しています。適切な対照を用いて、対象とする種での反応性を常に確認してください。

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