ウエスタンブロット、IF/ICC、ELISA用 抗IMPDH1 ウサギポリクローナル抗体 - P20839

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：IMPDH1の機能と局在

• IMPDH1は、イノシン-5'-一リン酸デヒドロゲナーゼ1をコードする。この酵素は、細胞の成長と増殖に必須なグアニンヌクレオチドのde novo合成において、IMPをXMPに変換する律速段階を触媒する鍵酵素である。
• このタンパク質は一本鎖核酸結合活性も示し、代謝機能を超えてRNAおよび/またはDNA代謝に関与する可能性が示唆されている。
• IMPDH1は主に細胞質に局在するが、核内でも検出可能であり、動的な細胞内分布を示している。
• 組織特異性：IMPDHタイプIは正常白血球における主要なアイソフォームであるのに対し、タイプIIは腫瘍細胞で優勢であり、IMPDH1の発現が分化と悪性化に関連していることを示している。
• この遺伝子は選択的スプライシングを受け、複数のアイソフォームを生成し、保存されたCBSドメインを持つIMPDHファミリーに分類される。
• 疾患関連には、レーバー先天性黒内障（LCA11）および網膜色素変性症（RP10）が含まれ、代謝以外の網膜の健康における役割が強調されている。
• 翻訳後修飾にはリン酸化とメチル化が含まれ、このタンパク質はカリウムなどの金属イオンを結合し、そのオキシドレダクターゼ活性の補因子としてNADを利用する。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトIMPDH1のC末端領域（アミノ酸434-563）に対応しており、特異性を向上させる可能性がある。ただし、アイソフォームや他のIMPDHファミリー構成員との交差反応性は、実験状況下で検証する必要がある。
• ウエスタンブロットでは、約55 kDaのバンドが予想される。HeLaやJurkat細胞ライセートなどの陽性対照の使用を検討し、検出システムに基づいて一次抗体の希釈率を最適化すること。
• 免疫蛍光/ICCでは、細胞を適切な方法（例：4% PFA）で固定し、核へのアクセスを可能にするために透過処理を行う。細胞質および核のシグナルの両方が観察される可能性があることに注意。
• ELISAアプリケーションでは、組換え免疫原をコーティング抗原として使用し、抗体結合を評価することができる。最適な作業濃度を決定するために抗体を滴定すること。

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