WB、IF/ICC、ELISA用抗IRAK1ポリクローナル抗体 - P51617

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：IRAK1の機能と局在

• IRAK1（インターロイキン-1受容体関連キナーゼ1）はセリン/スレオニンキナーゼであり、自然免疫応答の開始に必須で、Toll様受容体（TLR）およびIL-1受容体シグナル伝達経路の重要な媒介因子として機能します。
• TLR/IL-1Rが活性化すると、IRAK1はMYD88によって迅速に動員され、IRAK4によってリン酸化された後に自己リン酸化を起こし、これが下流のシグナル伝達イベントを引き起こします。
• IRAK1はペリノE3ユビキチンリガーゼ（PELI1、PELI2、PELI3）をリン酸化し、IRAK1自身のポリユビキチン化を促進することで、IKK複合体の動員とそれに続くNF-κBの核移行を誘導します。
• また、TIRAPをリン酸化してそのユビキチン化と分解を促進するほか、IRF7を直接リン酸化してI型インターフェロン産生を誘導し、抗ウイルス状態を確立します。
• 細胞内局在は細胞質、核、脂質滴に及びます。IRAK1のSUMO化は核移行を促進し、核内でIRAK1はSTAT3をリン酸化します。
• 主なアイソフォームは2種類存在し、ヒト組織全体で遍在的に発現しており、アイソフォーム1はアイソフォーム2よりも強く発現します。
• IRAK1は宿主-ウイルス相互作用に関与し、リン酸化、ユビキチン化、SUMO化をはじめとする多様な翻訳後修飾を受けます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトIRAK1のアミノ酸424～633に対応し、この領域はヒト、マウス、ラット間で保存されているため、観察されている交差反応性が支持されます。
• ウエスタンブロットでは、TLR/IL-1Rで刺激した免疫細胞（例：THP-1、RAW264.7）の全細胞溶解液を使用し、77 kDa付近の活性化依存的なバンドを検出することを推奨します。塩基性発現量は細胞によって異なる場合があります。
• IF/ICC実験では、固定・透過処理条件を最適化してください。内在性IRAK1は細胞型や刺激状態に応じて、細胞質と核の両方に局在する場合があります。
• ELISAでは、対応する検出抗体（例：異なるエピトープを認識する抗体）と組み合わせることで感度が向上する可能性があります。ご使用のサンプルマトリックスで検証を行ってください。
• ポリクローナル抗体のため、ロット間でばらつきが生じる可能性があります。各アッセイに陽性対照（例：刺激した細胞）と陰性対照を含めてください。

CamelBioについて：ワンストップ調達プラットフォーム

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