ウエスタンブロット、IHC-P、ELISA用 抗Islet1 モノクローナル抗体 - P61371

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：Islet1の機能と局在

• Islet1 (ISL1) は標的遺伝子プロモーター内のコンセンサスオクタマーモチーフ5'-ATAATTAA-3'を認識するDNA結合型転写活性化因子であり、遺伝子制御ネットワークにおいて中心的な役割を果たします。
• 網膜神経節細胞の分化に必須であり、POU4F2と協働してRGC標的遺伝子の発現を最大化します。
• LHX3およびLDB1と共に、運動ニューロンの仕様決定に関与します。
• インスリン遺伝子エンハンサー配列に結合し、膵島細胞の発生に寄与します（相同性による）。
• Islet1は心臓発生における重要な因子であり、流出路、右心室、心房細胞に寄与する前駆細胞集団をマークし、FGFおよびBMP増殖因子の制御を介した心臓前駆細胞の遊走と増殖に必要です。
• 主に核に局在します。
• ニューロンの一部（副腎髄質、脊髄後根神経節）、網膜の内顆粒層および神経節細胞層、松果体、特定の脳領域で発現しています。
• LIMホメオドメインファミリーに属し、2つのN末端LIMドメイン（亜鉛結合）とホメオボックスDNA結合ドメインを含みます。翻訳後修飾にはリン酸化とユビキチン化が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトIslet1の中心領域（アミノ酸200-300）に位置し、マウスでもよく保存されているため、観察された交差反応性を支持します。この配列は既知のアイソフォームにも存在するため、抗体は発現していれば複数のスプライスバリアントを検出する可能性があります。
• ウエスタンブロット（WB）では、約39 kDa付近に主要なバンドが期待されます。還元条件下での標準的なSDS-PAGEが適しています。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、核染色が予想されます。抗原賦活化法（例：pH 6または9での熱誘導エピトープリトリーバル）と抗体の希釈系列の予備試験が推奨されます。
• ELISAでは、免疫原ペプチドまたは全長タンパク質の直接または間接検出に本抗体を使用できます。適切な二次抗体との組み合わせを検討してください。
• Islet1の発生的・組織特異的な性質を考慮し、関連する陽性対照（例：網膜または心臓組織、運動ニューロン培養）および陰性対照（Islet1ノックアウト/ノックダウン）を用いた特異性の検証が推奨されます。

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