ウエスタンブロット、ELISA用 抗JNK3 ウサギポリクローナル抗体 - P53779

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景: JNK3の機能と局在

• JNK3は、MAPK10遺伝子によってコードされるセリン/スレオニンタンパク質キナーゼであり、ストレス活性化プロテインキナーゼ/c-Jun N末端キナーゼ (SAPK/JNK) ファミリーに属します。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。
• 炎症性サイトカインや物理的ストレスなどの細胞外刺激は、SAPK/JNKカスケードを活性化し、その中で二重特異性キナーゼMAP2K4およびMAP2K7がJNK3をリン酸化して活性化します。活性化されたJNK3は、次にJUNやATF2などの転写因子をリン酸化し、それによってAP-1依存性転写を調節します。
• JNK3は、STMN2やAPPなどの基質をリン酸化することにより神経細胞アポトーシスに重要な役割を果たし、らせん神経節ニューロンにおける神経分化、移動、および神経突起伸長に影響を与えます。
• JNK3は、CLOCK-BMAL1ヘテロ二量体をリン酸化することにより概日リズム調節に関与し（PubMed:22441692）、またJUNDをリン酸化します。この過程はMEN1によって阻害されます（PubMed:22327296）。
  関連参考文献:
  PMID:22441692
  PMID:22327296
• シグナル伝達とアポトーシスにおける役割と一致して、細胞質、核、ミトコンドリア、膜の間をシャトルします。
• 発現は主に神経細胞にみられ、海馬、小脳、線条体、脳幹で高レベルであり、精巣と腎臓では弱い発現を示します。
• JNK3は、パルミトイル化および複数の残基でのリン酸化を受け、これらはその細胞内局在とキナーゼ活性を調節します。MAPK10の変異は、てんかんや知的障害を含む神経疾患と関連しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原ペプチド (アミノ酸300-400) は、マウスおよびラットJNK3と共有される保存領域内に位置しており、種間検出を可能にします。ウエスタンブロットでは、関連するサンプルシステムで抗体を検証し、約44 kDa付近に主要なバンドが予想されます（アイソフォームや修飾により予測分子量は変動する可能性があります）。陽性対照として神経細胞株または脳組織ホモジネートを使用してください。
• ELISAでは、抗体はサンドイッチ法または間接法で使用できます。最適な感度を得るために、モノクローナル抗体による捕捉抗体とのペアリングを検討してください。JNK3のリン酸化は、ストレス刺激（例：アニソマイシン、UV）によって誘導され、活性化依存性シグナルをモニターできます。
• ポリクローナル抗体であるため、複数のアイソフォームまたは分解産物を認識する可能性があります。免疫原ペプチドを用いた前吸収は特異性を確認するために使用できます。

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