WB、IP、ELISA、ChIP用抗KDM5Aポリクローナル抗体 - P29375

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：KDM5Aの機能と局在

• リシン特異的脱メチル化酵素5A（KDM5A）は、JARID1A、RBBP-2、またはRBP2としても知られ、ヒストンH3（H3K4）のトリメチル化およびジメチル化リシン4から特異的にメチル基を除去するヒストン脱メチル化酵素であり、クロマチン調節および遺伝子転写において極めて重要な役割を果たします。
• KDM5Aは、H3K4me3およびH3K4me2を特異的に脱メチル化しますが、モノメチル化H3K4や他のヒストンリシン残基（H3K9、H3K27、H3K36、H3K79、H4K20）は脱メチル化せず、これによりヒストンコードのダイナミクスに寄与します。
• 5'-CCGCCC-3'モチーフのDNAに直接結合することで遺伝子転写を調節し、下流の標的遺伝子の発現に影響を与えます。 関連参考文献： PMID:18270511
• KDM5Aは、細胞分化中のHoxタンパク質の転写制御に関与しており、CXCL12などのサイトカインを抑制したり、CLOCK-BMAL1との脱メチル化酵素非依存性補助活性因子機能を通じて概日リズムを調節したりする可能性があります。 関連参考文献： PMID:19430464
• このタンパク質は核と核小体に局在しており、クロマチン修飾および転写調節における役割と一致しています。
• KDM5Aは、特定の遺伝子（例：MT1F）の転写コプレッサーとして機能し、がん細胞の増殖を促進することが報告されており、腫瘍学におけるその潜在的な重要性を浮き彫りにしています。 関連参考文献： PMID:27427228
• Jumonji/ARIDドメイン含有タンパク質として、KDM5Aはヒストン脱メチル化酵素のJARIDファミリーに属しており、鉄と2-オキソグルタル酸を必要とする酸素化酵素活性によって特徴づけられます。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• ウェスタンブロット（WB）では、KDM5Aの分子量が大きい（約192 kDa）ため、低濃度のアクリルアミドゲルを使用し、適切なバッファーと延長した転送時間を用いてタンパク質の転送を十分に行うようにしてください。
• 免疫沈降（IP）では、この抗体のポリクローナルな性質が捕捉効率を高める可能性がありますが、アイソタイプ対照を含め、標的特異的検出によって回収を検証してください。
• クロマチン免疫沈降（ChIP）では、組換え全長免疫原に基づき、この抗体は機能すると予測されますが、抗体の滴定を行い、実験系において既知のKDM5A標的プロモーターの濃縮を確認することをお勧めします。
• ELISAアプリケーションでは、コーティング抗原と抗体希釈の最適化が必要な場合があります。陽性対照として組換え免疫原を使用することを検討してください。

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