WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗KEAP1ウサギポリクローナル抗体 - Q14145

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：KEAP1の機能と局在

• KEAP1（Kelch様ECH関連タンパク質1）は、INrf2またはKLHL19とも呼ばれ、BCR（BTB-CUL3-RBX1）E3ユビキチンリガーゼ複合体の基質特異的アダプターとして機能する、細胞質および核に存在する70 kDaのタンパク質です。
• 基礎条件下では、KEAP1は転写因子NFE2L2/NRF2をユビキチン化し、プロテアソームによる分解を促進することで、細胞保護遺伝子の発現を抑制します。 関連文献： PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695 PMID:15601839 PMID:16006525
• 主要な酸化ストレスセンサーとして、KEAP1には反応性の高いシステイン残基が存在し、求電子剤による非酵素的な共有結合修飾を受けます。これによりリガーゼ複合体が不活性化され、続いてNRF2が核内に蓄積します。 関連文献： PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• KEAP1はSQSTM1/p62と相互作用することで選択的オートファジーにも関与します。これによりKEAP1が封入体へ隔離され、NRF2がさらに活性化される一方、SQSTM1/p62のユビキチン化および分解も同時に媒介されます。 関連文献： PMID:20452972 PMID:28380357
• KEAP1を含むユビキチンリガーゼ複合体のその他の基質にはBPTFおよびPGAM5が含まれ、その広範な調節機能が示されています。 関連文献： PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1はヒト組織全体に広く発現しており、特に骨格筋で高い発現レベルを示します。このタンパク質は特徴的なKelchリピートおよびBTBドメインを含み、S-ニトロシル化やユビキチン化などの翻訳後修飾を受けます。

実験上の指針と技術的ヒント

• 免疫原はヒトKEAP1のアミノ酸320～510で構成されています。この領域により、全長KEAP1および種間で保存されたエピトープを認識できる可能性があります。使用するサンプル系で特異性を確認してください。
• ウエスタンブロッティングでは、予測分子量約70 kDaに相当するバンドが予想されます。適切な陽性対照および陰性対照を含めてください。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、KEAP1は細胞質および核の両方で検出される可能性があります。固定および透過化の工程を最適化することを検討してください。
• 報告されている交差反応性はヒト、マウス、ラットを含みますが、各種における性能は、関連する組織または細胞株を用いて検証する必要があります。
• ELISAでは、組換えタンパク質免疫原であることから、捕捉または検出系での使用が期待されます。標的タンパク質および対照タンパク質を用いて、結合親和性と特異性を確認してください。

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