ウエスタンブロット、IF/ICC、ELISA用 抗KIF5Aウサギポリクローナル抗体 - Q12840

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：KIF5Aの機能と局在

• KIF5Aはニューロン特異的キネシン重鎖であり、Neuronal kinesin heavy chain (NKHC)とも呼ばれ、KIF5A (NKHC1)遺伝子によってコードされる。
• これは微小管依存性のモータータンパク質として機能し、神経フィラメントタンパク質（NFH、NFM、NFL）の遅い軸索輸送に必須である。
• KIF5Aは、非神経細胞においてZFYVE27依存的に神経突起様膜突出の形成を誘導することができる。
• ZFYVE27-KIF5A複合体は、ニューロンにおけるVAPA、VAPB、SURF4、RAB11A、RAB11B、RTN3などのいくつかのタンパク質の小胞輸送に関与している。
• これは、軸索伸長におけるMAPK8IP3/JIP3の機能に必須であるMAPK8IP3/JIP3の順行性軸索輸送に必要である。
• 細胞内では、KIF5Aは細胞質、核周辺領域、細胞骨格、特にニューロンの細胞体に局在する。
• KIF5Aは中枢神経系全体に分布しているが、ニューロンのサブセットで高度に濃縮されている。
• KIF5Aに関連するキーワードには、神経変性疾患における役割が含まれ、疾患変異は筋萎縮性側索硬化症、遺伝性痙性対麻痺、てんかんと関連している。アセチル化やリン酸化などの翻訳後修飾を受ける。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトKIF5AのC末端領域（アミノ酸933-1032）に対応している。この領域は比較的保存されており、観察されたマウスおよびラットとの交差反応性を支持する。
• ウエスタンブロットでは、予測分子量は約117 kDaである。高分子量タンパク質用にゲルのパーセンテージと転写条件を最適化し、類似サイズのローディングコントロールの使用を検討すること。
• 免疫蛍光/ICCでは、使用する神経細胞タイプに対する固定および透過化プロトコルを検証し、細胞骨格マーカー（例：チューブリン）との共染色により細胞内局在を確認することができる。
• ELISA適用はKIF5Aの検出に使用できるが、適切なコントロールと標準曲線が確立されていることを確認すること。KIF5A発現はニューロン特異的であることに注意。

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