IF/ICCおよびELISA用 抗KLRK1 ウサギポリクローナル抗体 - P26718

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：KLRK1/NKG2Dの機能と局在

• KLRK1（NKG2D、CD314とも呼ばれる）は、NKG2-D型II膜貫通タンパク質、キラー細胞レクチン様受容体サブファミリーKメンバー1をコードします。これは、自然免疫および獲得免疫監視の中核となる活性化および共刺激受容体として機能します。
• 腫瘍細胞やウイルス感染細胞上のストレス誘導性MHCクラスI関連リガンド（例：MICA/B、ULBP1-6）に結合すると、NKG2Dは刺激シグナルを伝達し、カルシウム流入を引き起こし、最終的にTNF-α発現とパーフォリン媒介性細胞傷害作用に至ります。
• ナチュラルキラー（NK）細胞では、NKG2Dは一次活性化シグナルと共刺激シグナルの両方を提供します。一方、CD8+ T細胞では、TCR媒介性の適応応答を増幅する共刺激受容体として機能します。
• この受容体は、末梢血由来のほぼすべてのCD56+CD3- NK細胞、ならびにCD8+ αβおよびγδ T細胞、インターフェロン産生キラーデンドリティック細胞（IKDCs）上に発現しています。
• 細胞内局在的には、NKG2Dはシグナルアンカー型の膜貫通タンパク質として細胞膜に局在します。グリコシル化を受け、細胞外リガンド結合ドメイン内にジスルフィド結合を含みます。
• 構造研究（3D構造）によりリガンドとの結合界面が解明されており、このタンパク質はリファレンスプロテオームのメンバーであり、選択的スプライシングにより追加のアイソフォームが生成されます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトKLRK1（NP_031386.2）のアミノ酸50–150にわたる合成ペプチドでした。適切な認識のためには、抗体が標的配列が保存され、エピトープがアクセス可能なサンプル（例：IF/ICC用の非変性条件）に適用されていることを確認してください。
• IL-2活性化NK細胞やKLRK1発現が知られているCD8+ T細胞株などの陽性対照を用いて、特定の細胞コンテキストで抗体を検証してください。ELISAの場合、サンドイッチ免疫測定法を開発する際はキャプチャー抗体との併用を検討してください。
• ここではテストされていませんが、KLRK1は細胞外リガンド結合ドメインを持つ膜貫通タンパク質です。フローサイトメトリー実験で膜表面をそのまま検出するためには、透過処理を避ける細胞表面染色プロトコルを検討してください。

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