ウエスタンブロットおよびELISA用抗LCATウサギポリクローナル抗体 - P04180

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：LCATの機能と局在

• LCAT（ホスファチジルコリン-ステロールアシルトランスフェラーゼ）、別名レシチンコレステロールアシルトランスフェラーゼは、細胞外リポ蛋白質代謝における中心的な酵素であり、主に肝臓で合成され血漿中に分泌される。高密度および低密度リポ蛋白質（HDLおよびLDL）の表面で、コレステロールとホスファチジルコリン（レシチン）をコレステリルエステルとリゾホスファチジルコリンに変換する反応を触媒し、逆コレステロール輸送を促進する（PubMed:10329423, PubMed:19065001, PubMed:26195816）。 関連文献： PMID:10329423 PMID:19065001 PMID:26195816

• この酵素は、血漿中の16:0-18:2または18:O-18:2ホスファチジルコリンに対して基質特異性を示し、リポ蛋白質組成の調節に寄与する（PubMed:8820107）。 関連文献： PMID:8820107

• 脳内では、LCATはアストロサイトによって産生され、新生のAPOE含有リポ蛋白質上の遊離コレステロールをエステル化し、脳脊髄液中のAPOEおよびAPOA1レベルに影響を与える。APOEおよびABCA1と共に、グリア由来リポ蛋白質の成熟およびHDL粒子の球状形態へのリモデリングに必須である（PubMed:10722751）。 関連文献： PMID:10722751

• LCATは内在性の血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ（PAF-AH）活性を有し、PAFをリゾ-PAFへ加水分解する反応と、PAFを1-ヘキサデカノイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリンへトランスアセチル化する反応の両方を触媒し、リポ蛋白質代謝と炎症性メディエーター調節を結びつけている（PubMed:8016111）。 関連文献： PMID:8016111

• この酵素はまた、(24S)-ヒドロキシコレステロール（セレブロステロール）をエステル化して24(S)OH-Cモノエステルを生成し、この反応は脳内コレステロール恒常性に関連する可能性がある（PubMed:24620755）。 関連文献： PMID:24620755

• 分泌タンパク質として、LCATは主に細胞外空間（血漿および脳脊髄液を含む）で作用し、循環リポ蛋白質を修飾する。シグナルペプチドと構造的完全性に重要なジスルフィド結合を含む糖タンパク質である。

• 組織発現は肝臓、脳、精巣で最も高く、血漿および脳脊髄液でも有意に検出され、全身および神経脂質代謝におけるその役割と一致する。

• LCATの病原性バリアントは、角膜ジストロフィーおよびHDL代謝異常症と関連しており、脂質関連疾患におけるその臨床的関連性を強調している。

実験ガイドラインおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトLCATのほぼ全長（アミノ酸25–440）にわたるため、この抗体は複数のエピトープを認識し、天然および変性タンパク質の検出に適している可能性がある。
• ウエスタンブロッティングでは、標準的なSDS-PAGEおよび転写条件を使用すること。予測分子量は約50 kDa。ポリクローナル抗体の性質上、複数のバンドが現れる可能性があるため、適切な陰性対照および陽性対照を含めること。
• マウスLCATとの交差反応性が報告されており、この抗体はマウスモデル研究の候補となる。ただし、実験系における種特異的反応性を検証すること。
• ELISA応用では、ポリクローナル抗体は様々な結合特性を示す可能性があるため、目的の感度を達成するためにコーティング抗原濃度および抗体希釈率を最適化すること。

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