WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗LRRK2ウサギポリクローナル抗体 - Q5S007

製品の基本仕様およびパラメータ

生物学的背景：LRRK2の機能と局在

• LRRK2は、多様な基質をリン酸化する大型のマルチドメイン型セリン／スレオニンプロテインキナーゼであり、神経可塑性、自然免疫、オートファジー、ならびに小胞輸送において重要な役割を果たします。 関連文献： PMID:17114044 PMID:20949042 PMID:21850687

• LRRK2はRAB GTPaseの主要な調節因子として機能し、RAB3A-D、RAB5A-C、RAB8A/B、RAB10、RAB12、RAB29、RAB35、RAB43など複数のRABをリン酸化することで、GTP／GDP交換およびタンパク質間相互作用を制御します。 関連文献： PMID:23395371 PMID:26824392 PMID:28720718 PMID:29125462

• LRRK2は、RAB8AおよびRAB10のリン酸化を介して、脳内の一次繊毛形成およびソニックヘッジホッグ（SHH）シグナル伝達を調節します。また、RAB29とともに、リソソームとゴルジ体の間におけるレトロマー依存性の逆行輸送を媒介します。 関連文献： PMID:23395371 PMID:29125462 PMID:30398148

• LRRK2はキナーゼ活性に加えて、Rocドメインを介したGTPase機能を有し、この機能はキナーゼ活性を相互に調節します。また、RAB29によって過負荷状態のリソソームへリクルートされ、EHBP1／EHBP1L1エフェクターを介してリソソーム内容物の放出を促進し、リソソームの肥大化を抑制します。 関連文献： PMID:18230735 PMID:26824392 PMID:28720718 PMID:30209220 PMID:38227290

• LRRK2は、カルシウム依存性のCaMKK／AMPK経路を介してオートファジーを正に調節します。この過程には、NAADP受容体の活性化、リソソームpHの上昇、カルシウム放出が関与します。 関連文献： PMID:22012985

• LRRK2はNOD1／NOD2下流におけるRIPK2の活性化を増強することで自然免疫を調節します。また、キナーゼ活性とは独立して、MAPT（タウ）のプロテアソーム分解を阻害し、そのオリゴマー化および分泌を促進します。 関連文献： PMID:27830463 PMID:26014385

• LRRK2は、細胞質小胞、ゴルジ体、小胞体、ミトコンドリア、エンドソーム、リソソーム、シナプス小胞など、複数の細胞内区画に局在します。また、脳、心臓、肝臓などのさまざまな組織に広く発現しています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトLRRK2のアミノ酸750～910に相当し、ロイシンリッチリピートドメインのN末端側に位置する領域です。生成されたポリクローナル抗体は複数のエピトープを認識する可能性があり、さまざまなアイソフォームまたは切断産物の検出に適している可能性があります。
• ウェスタンブロットでは、LRRK2の高分子量（約286 kDa）を考慮してください。効率的なブロッティングを確保するため、低濃度のポリアクリルアミドゲル（例：6～8%）を使用し、転写条件（例：長時間のウェットトランスファー）を最適化してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化法（熱誘導法または酵素法）により検出性が向上する場合があります。使用する組織および固定条件で抗体を検証してください。
• 免疫蛍光法／免疫細胞化学（IF/ICC）では、エピトープへのアクセス性を維持するため、透過化処理および慎重な固定が必要になる場合があります。オルガネラマーカーとの共染色により、局在パターンの確認に役立ちます。
• ELISA：本抗体は捕捉試薬または検出試薬として使用できます。サンドイッチELISAの開発には、検証済みのLRRK2抗体クローンとの組み合わせを検討してください。

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