IHC-P、IF/ICC、ELISA用 Anti-MAD2/MAD2L1 ポリクローナル抗体 - Q13257

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：MAD2/MAD2L1の機能と局在

• MAD2L1は、染色体分配の正確性を調節する重要な因子である、分裂期紡錔体集合チェックポイントタンパク質MAD2A（MAD2-like protein 1としても知られる）をコードします。
• MAD2L1は、分裂期チェックポイント複合体（MCC）の中核構成要素であり、後期促進複合体/シクロソーム（APC/C）を阻害して、すべての染色体が紡錘体に正しく接着するまで染色体分配を遅延させます。 関連参考文献： PMID:10700282 PMID:11804586 PMID:15024386
• CDC20、MAD2L1/MAD2、BUB1B/BUBR1、およびBUB3からなるMCCは、紡錘体集合チェックポイントの主要なエフェクトーとして機能します。 関連参考文献： PMID:15020684 PMID:27509861
• MCC結合型APC/Cは不活性のままであり、中期から後期への移行を防ぎます。チェックポイントの解除は、CDC20のUBCH10媒介型自己ユビキチン化を引き起こし、APC/Cの再活性化につながります。 関連参考文献： PMID:27509861
• MAD2L1は動的な構造スイッチを行います。閉じたコンフォーマー（C-MAD2）は、未接着のキネトコアでMAD1L1と複合体を形成し、開いたMAD2（O-MAD2）を募集してC-MAD2への変換を触媒することで、チェックポイントシグナルを増幅させます。 関連参考文献： PMID:29162720
• 細胞内では、MAD2L1は核、セントロメアのキネトコア、紡錘体極、および細胞質に局在しており、その多面的な分裂期機能を反映しています。
• このタンパク質はアセチル化およびリン酸化を受け、選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。これらの修飾および変異体は、チェックポイント活性やタンパク質相互作用を調節する可能性があります。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はヒトMAD2L1のN末端205アミノ酸に相当します。近縁のタンパク質との交差反応性が生じる可能性があるため、特定のアッセイシステムにおいてアイソフォームと種特異性を確認することを検討してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）の場合、抗原回収法と固定条件は染色に影響を与える可能性があります。適切な陽性対照（例：分裂期組織）および陰性対照を使用して、最適化を行うことを推奨します。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、分裂期中にキネトコアおよび紡錘体極の標識が期待されます。セントロメアまたはチューブリンマーカーとの二重染色は、標的との結合を確認するのに役立ちます。
• ELISAの場合、精製された組換えMAD2L1タンパク質を陽性対照として使用できます。最適なシグナル対ノイズ比を確立するために、抗体および抗原濃度の滴定を行うことをお勧めします。
• 細胞種や実験条件によってパフォーマンスが異なる可能性があるため、常に特定のサンプルおよびアプリケーションコンテキストで抗体を検証してください。

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