Anti-MAD2/MAD2L1 ウサギポリクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q13257

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：有糸分裂紡錘体形成チェックポイントタンパク質 MAD2A の機能と局在

• MAD2L1 (MAD2A) は、有糸分裂チェックポイント複合体 (MCC) の重要な構成要素であり、後期促進複合体/サイクロソーム (APC/C) を阻害して、すべての染色体が正しく有糸分裂紡錘体に付着するまで染色体分離を遅延させます。
  関連参考文献:
  PMID:10700282
  PMID:11804586
  PMID:15024386
• MCC は CDC20、MAD2L1、BUB1B/BUBR1、および BUB3 で構成され、APC/C への結合により複合体を不活性状態に維持し、早期の後期開始を防ぎます。
  関連参考文献:
  PMID:15020684
  PMID:27509861
• 紡錘体形成チェックポイントがサイレンシングされると、MCC-APC/C 複合体は E2 酵素 UBCH10 をリクルートし、CDC20 の自己ユビキチン化と分解を引き起こします。これにより APC/C が再活性化され、中期/後期遷移が駆動されます。
  関連参考文献:
  PMID:27509861
• MAD2L1 は、開いた (O-MAD2) と閉じた (C-MAD2) という2つの異なる立体構造をとります。閉じた構造体は、付着していない動原体で MAD1L1 と集合してテンプレートを形成し、O-MAD2 から C-MAD2 への変換を触媒することでチェックポイントシグナルを増幅します。
  関連参考文献:
  PMID:29162720
• 選択的スプライシングにより、2つのアイソフォーム (MAD2A と MAD2B) が産生されます。MAD2A (MAD2L1 によってコードされる) は、紡錘体チェックポイント機能に必須な、有糸分裂によって制御されるアイソフォームです。
• このタンパク質は細胞周期を通じて動的に局在します：間期には細胞質と核に存在し、有糸分裂期には動原体と紡錘体極に濃縮され、チェックポイント活性化時に再局在します。
• アセチル化やリン酸化などの翻訳後修飾は、MAD2L1 の活性と相互作用を微調整します。UniProt で計算された分子量は約 23.5 kDa、製品データでは約 24 kDa を示しています。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原 (aa 1-205) は、MAD1 との相互作用と立体構造変換に重要な N 末端領域を含んでいます。この設計により、O-MAD2 と C-MAD2 の両方の形態を検出できる可能性があります。
• ウェスタンブロットでは、24 kDa 付近のバンドを予想してください。特異性を確認するために、間期対照とともに、有糸分裂期に同期させた細胞（例：ノコダゾール処理）を使用してください。
• ELISA アプリケーションでは、直接法またはサンドイッチ法を活用できます。組換え MAD2L1 タンパク質を標準品として使用することを検討してください。
• 配列保存性に基づき、この抗体はマウスおよびラットの MAD2L1 と交差反応すると予測されます。適切な組織または細胞ライセートでの検証をお勧めします。
• 機能研究では、有糸分裂期細胞集団を濃縮しシグナル検出を強化するために、細胞同期化プロトコルと組み合わせてください。

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