ウエスタンブロット、ELISA用 抗MDA5 ウサギポリクローナル抗体 - Q9BYX4

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景: MDA5の機能と局在

• MDA5 (IFIH1) は、Helicard、RLR-2、またはメラノーマ分化関連タンパク質5としても知られ、細胞質DExD/H-box RNAヘリカーゼであるRIG-I様受容体 (RLR) ファミリーの一員です。
• ウイルス核酸の自然免疫センサーとして機能し、I型インターフェロンや炎症性サイトカインの誘導を含む抗ウイルス応答の開始に主要な役割を果たします (PubMed:28594402, PubMed:32169843, PubMed:33727702)。 関連文献: PMID:28594402 PMID:32169843 PMID:33727702
• MDA5は、長い二本鎖RNA (>1 kb) および5'キャップに2'-O-メチル化を欠くmRNAを病原体関連分子パターンとして認識します (PubMed:22160685)。 関連文献: PMID:22160685
• リガンド結合により、MDA5はミトコンドリア抗ウイルスシグナルタンパク質MAVSと会合し、TBK1/IKBKEキナーゼの活性化とIRF3/IRF7のリン酸化を引き起こしてインターフェロン遺伝子転写を駆動します。
• この受容体は、EMCVやライノウイルスなどのピコルナウイルス、デングウイルスや西ナイルウイルスなどのフラビウイルス、レオウイルス、ワクシニアウイルス、コロナウイルスSARS-CoV-2など、幅広いウイルスを検出します (PubMed:28606988, PubMed:33440148, PubMed:33514628)。 関連文献: PMID:28606988 PMID:33440148 PMID:33514628
• 細胞内では、MDA5は細胞質、核、およびミトコンドリアに存在します。
• 広範に低発現しており、胎盤、膵臓、脾臓で相対的に豊富ですが、脳、精巣、肺ではほとんど検出されません。
• MDA5はリン酸化タンパク質であり、CARDドメイン、ATP依存性DExD/H-boxヘリカーゼドメイン、およびC末端ドメインを含み、調節的なユビキチン化を受けます。

実験ガイドと技術的ヒント

• この抗体の作製に使用された免疫原は、ヒトIFIH1のアミノ酸277–490を包含しています。フルレングスタンパク質 (~117 kDa) だけでなく、潜在的な短いアイソフォームや切断産物も検出する可能性があります。
• ウエスタンブロッティングでは、インターフェロン刺激またはウイルス感染させたヒト細胞のライセートを使用してMDA5発現をアップレギュレートすることを検討してください。適切な陽性対照および陰性対照を含め、予測分子量に対するバンドサイズを確認してください。
• ELISAを実施する際は、適切な組換えまたは天然MDA5標準品と組み合わせて抗体を使用し、コーティングおよび検出条件を最適化してください。他のRLRファミリーメンバーとの交差反応性を評価する必要があります。
• どのポリクローナル抗体でも同様に、ロット間変動が性能に影響を与える可能性があります。特定のアッセイシステムで新しいロットごとに力価測定と検証を行うことを推奨します。

CamelBio: ワンストップ調達の架け橋

CamelBioは、コンセプトから臨床応用までの診断薬開発を支援するため、IVD原材料、技術サービス、コンサルティングへのワンストップアクセスを提供します。当社のポートフォリオには、自然免疫研究のためのこの抗MDA5抗体のような検証済みポリクローナル抗体が含まれており、グローバルネットワークを通じて抗体ペア、バルクの補助試薬、希少ターゲットを調達することができます。信頼性が高く、サプライチェーンに統合された原材料で、CamelBioがあなたのアッセイ開発を加速します。