WB、ELISA用抗ME2ポリクローナル抗体 - P23368

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ME2の機能と局在

• ME2（NAD依存性リンゴ酸脱水素酵素、ミトコンドリア）は、ODS1やmalic enzyme 2としても知られます。ヒトではME2遺伝子によってコードされます。
• この酵素は、補因子としてNAD+を使用して、リンゴ酸の酸化的脱炭酸反応をピルビン酸へ触媒します。この反応は、TCAサイクルとピルビン酸代謝およびNADH産生を結びつける上で重要です。
• ME2はアロステリック酵素であり、活性に2価金属イオン（通常はMg2+またはMn2+）を必要とします。これらは基質結合と触媒作用を促進します。
• このタンパク質はミトコンドリアマトリックスに局在し、そこでリンゴ酸代謝に関与します。N末端移行ペプチドを介してミトコンドリアに輸送され、移行後に切断されます。
• 代替スプライシングにより複数の転写産物バリアントが生成され、異なる調節特性や発現パターンを持つアイソフォームが生じる可能性があります。
• 翻訳後修飾にはアセチル化が含まれ、これは細胞の代謝状態に応じて酵素活性や安定性を調節する可能性があります。
• ME2は広く発現していますが、肝臓、心臓、脳などミトコンドリア活性が高い組織において特化した役割を果たし、脂質およびアミノ酸代謝に寄与します。
• UniProtのキーワードは、その特性を強調しています：3D-structure（構造データあり）、アセチル化、アロステリック酵素、代替スプライシング、直接タンパク質シーケンシング、金属結合、ミトコンドリア、NAD、酸化還元酵素、およびリファレンスプロテオーム。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトME2のC末端領域（aa 220-479）を対象に設計されています。この領域はN末端移行ペプチドとは異なるため、この抗体は成熟したミトコンドリア型を認識すると期待されます。
• ポリクローナル抗体として、代替スプライシングによって生じる複数のアイソフォームを検出する可能性があります。ウェスタンブロットでは、主なバンドは約65 kDaに現れると期待されますが、サンプルや条件によっては追加のバンドが現れる可能性があります。
• WBの場合、ミトコンドリアが濃縮されたライセートや、ミトコンドリア含量が高い組織（肝臓、心臓など）を使用すると、検出感度が向上する可能性があります。バックグラウンドを低減するために、ブロッキングと洗浄条件を最適化してください。
• ELISAでは、直接法または間接法の検出に使用できます。特異性を確認し最適な希釈率を決定するために、組換えME2タンパク質または細胞ライセートで検証してください。
• 交差反応性はヒトME2について記載されています。他の種については、使用前に免疫原領域の配列相同性を確認してください。反応性は保証されません。

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