WB、IF/ICC、IP、ELISA用抗MEK1ウサギモノクローナル抗体 - Q02750

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：MEK1の機能と局在

• MEK1（MAP2K1）は二重特異性キナーゼであり、ERK1/2（MAPK3/1）の活性化ループ内のスレオニン残基とチロシン残基の両方をリン酸化します。これはMAPK/ERKシグナル伝達カスケードにおける重要なステップです。
• RAS-RAF1の下流で作用し、細胞表面受容体から細胞内エフェクターへのシグナル伝達に必須であり、細胞増殖、分化、生存などのプロセスを制御しています。
• KSR1/KSR2依存的機構を介してBRAFを活性化し、BRAFの自己阻害を解除してシグナル伝達を増強します。 関連文献: PMID:29433126
• 細胞内局在は細胞質、中心体、紡錘体極、核、膜にわたり、有糸分裂（ゴルジ体断片化）、エンドソーム輸送、核外輸送（例：PPARG）における役割を反映しています。
• ヒト組織に広く発現しており、特に脳での発現量が低いことが知られています。疾患関連変異は心筋症、外胚葉異形成、知的障害と関連しています。
• MEK2（MAP2K2）を含むMAPキナーゼキナーゼファミリーに属し、リン酸化およびアセチル化によって制御されています。
• MEK1が駆動するMAPK/ERK経路は核内受容体PPARGの局在に影響を与え、代謝シグナルとアポトーシスシグナルを統合しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体ではヒトMEK1のアミノ酸1～100に対応する合成ペプチドを免疫原として使用しています。エピトープマッピングから、保存性の高いN末端領域を認識することが示唆されています。ただし、特異性が重要な実験を行う場合は、MEK2との交差反応性を実験的に排除する必要があります。
• ウェスタンブロッティングでは、約43 kDaのバンドが検出されることが予想されます。HeLa、NIH/3T3、PC12など、MEK1の発現が知られているヒト、マウス、またはラット細胞株の陽性対照溶解物を使用して検証してください。
• 免疫蛍光/ICCでは、固定/透過処理条件の最適化を行ってください。MEK1は細胞の状態に応じて、細胞質、膜結合型、または核に存在することがあるためです。
• 免疫沈降では、タンパク質相互作用を保存するために穏やかな溶解バッファーを使用してください。MAPK経路成分の共免疫沈降を行う場合は、架橋を検討してください。
• ELISA用途では、組換えMEK1または内因性MEK1の検出に本抗体を使用できます。滴定を行い、適切な対照を含めてください。

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