ウエスタンブロットおよびELISA用 抗METウサギポリクローナル抗体 - P08581

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：肝細胞増殖因子受容体（MET）の機能と局在

• MET（c-Met、HGFR）は、肝細胞増殖因子（HGF）に特異的に結合する膜貫通型受容体型チロシンキナーゼであり、増殖、運動性（散開）、形態形成、生存を含む多面的な細胞応答を引き起こします。
• HGF誘導性二量体化により、METは細胞質内チロシン残基を自己リン酸化し、GRB2、GAB1、SRCなどのアダプタータンパク質のための結合部位を形成します。これらは順に、RAS/ERK、PI3K/AKT、PLCγ/PKCシグナルカスケードを活性化し、細胞骨格の再編成と転写プログラムを駆動します。
• METシグナル伝達は、胚発生（原腸陥入、筋芽細胞遊走、肝臓および腎臓の発達）および出生後の創傷治癒、器官再生、骨恒常性などの過程において必須です。
• 成熟MET受容体は、細胞外α鎖とチロシンキナーゼドメインを持つ単回膜貫通型β鎖からなるヘテロ二量体です。主に原形質膜に局在し、細胞外ドメインの切断により可溶型が生成される可能性があります。
• ヒトでは、METは肝臓、胃腸管、甲状腺、腎臓、皮膚の上皮細胞に広く発現しており、特に肝細胞、胃および腸上皮、基底角化細胞で高レベルです。タンパク質レベルでは、脳および骨幹端端部にも存在します。
• リステリア・モノサイトゲネス（Listeria monocytogenes）の内部タンパク質InlBとの相互作用を介した侵入受容体として、METは微生物侵入の病態生理学的メカニズムを示しており、その異常な活性化（変異、遺伝子増幅、または過剰発現による）は発がん性形質転換に関与しているため、重要な治療標的となっています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトMETの細胞質領域（アミノ酸960–1161）に対応しており、キナーゼドメイン配列を含みます。この領域はヒトとラット間で高度に保存されており、観察された交差反応性を支持します。
• ウエスタンブロット解析では、METを発現することが知られている細胞株（例：A549、HeLa、または肝細胞株）または組織サンプル（肝臓、腎臓）からのライセートを使用できます。約156 kDa付近のバンド、およびグリコシル化型や切断型を表す可能性のある追加バンドを予期してください。
• ELISAを実施する際は、この抗体をペアとなるモノクローナル抗体とサンドイッチ法で捕捉または検出試薬として使用することを検討してください。コーティング濃度と検出条件の最適化が推奨されます。
• METは膜貫通型受容体であるため、濃縮膜分画または免疫沈降法はWBでのシグナルを改善する可能性があります。エピトープを保持するために、非変性界面活性剤（例：1% Triton X-100）を含む溶解バッファーを使用することをお勧めします。

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