WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗METTL3 ウサギポリクローナル抗体 - Q86U44

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: METTL3の機能と局在

• タンパク質の同定: N(6)-アデノシンメチルトランスフェラーゼ触媒サブユニットMETTL3 (別名: メチルトランスフェラーゼ様タンパク質3 (hMETTL3) または MT-A70) は、METTL3-METTL14 RNA N6-メチルトランスフェラーゼ複合体の触媒成分です。

• 中核的なN6-メチルトランスフェラーゼ機能: METTL3-METTL14ヘテロ二量体は、RNA上のN6-メチルアデノシン (m6A) の形成を触媒し、優先的に5'-[AG]GAC-3'コンセンサスモチーフで作用します。m6A修飾はmRNAの安定性、プロセシング、翻訳効率、編集を調節し、多様な生物学的プロセスに影響を与えます。 関連文献: PMID:22575960 | PMID:24284625 | PMID:25719671 | PMID:27281194 | PMID:27373337 | PMID:27627798

• 生物学的役割: METTL3を介したm6Aメチル化は、概日時計の調節、胚性幹細胞および造血幹細胞の分化、皮質神経発生、T細胞恒常性、精子形成、卵形成、DNA損傷応答に関与しています。

• 細胞内局在: 主に核に存在し、核スペックルに濃縮されています。細胞質でも検出され、これは核内RNA修飾と細胞質内での翻訳促進機能と一致します。

• 組織特異性: 低レベルで遍在的に発現。特に脾臓、胸腺、前立腺、精巣、卵巣、小腸、結腸、末梢血白血球で検出されます。

• 翻訳後修飾とキーワード: アセチル化、リン酸化、ユビキチン結合を受けます。RNA結合ドメインおよびS-アデノシル-L-メチオニン結合ドメインを有し、分子量は64,474 Daです。

• がんとの関連性: 複数のがん種で過剰発現が観察され、メチルトランスフェラーゼ活性に依存しないmRNA翻訳の促進を介して、一部細胞増殖を促進します。 関連文献: PMID:27117702

• 追加の基質: 一次miRNA (pri-miRNA) をメチル化してDGCR8による認識とプロセシングを促進し、SARS-CoV-2 RNAを修飾してRIG-I依存性自然免疫センシングを減弱させます。 関連文献: PMID:25799998 | PMID:33961823

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原設計: 免疫原はヒトMETTL3のN末端1-156アミノ酸に対応しており、ヒト、マウス、ラット間でよく保存されているため、交差反応性の主張を裏付けています。
• ウェスタンブロット (WB): 全細胞または核ライセートを使用します。約64 kDa付近のバンドが期待されます。翻訳後修飾やアイソフォームバリアントが移動度に影響を与える可能性があるため、特定のサンプル系での抗体性能を検証してください。
• 免疫組織化学 (IHC-P) および免疫蛍光 (IF/ICC): パラフィン切片では抗原賦活化が必要な場合があります。核および核スペックル染色が主となりますが、細胞タイプや固定条件によっては細胞質シグナルも観察される可能性があります。
• ELISA: 本抗体は、組換えMETTL3またはペプチド抗原に対する検出試薬として使用できます。サンドイッチELISA開発のためには、METTL3捕捉抗体とのペアリングが検討可能です。
• 交差反応性: ヒト、マウス、ラットのMETTL3を認識すると報告されています。各種において、適切な陽性対照および陰性対照を用いた検証が推奨されます。

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