WB、ELISA用抗MGMTラビットモノクローナル抗体 - P16455

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：MGMTの機能と局在

• 公式なタンパク質名はMethylated-DNA--protein-cysteine methyltransferaseで、一般にO-6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT)として知られています。また、O-6-methylguanine-DNA-alkyltransferaseとも呼ばれます。
• MGMTは、アルキル化剤の変異原性および細胞毒性効果に対して細胞防御を提供する重要なDNA修復酵素です。DNA内のO6-メチルグアニン (O6-MeG) およびO4-メチルチミン (O4-MeT) から特異的にメチル基を除去します。
• 修復メカニズムは、損傷した核酸塩基から酵素の活性部位システイン残基へのメチル基の化学量論的な移動です。これは自殺反応であり、酵素は1回の反応後に不可逆的に不活性化されます。
• MGMTは主に核に局在しており、そこでゲノムDNAの損傷に遭遇します。
• このタンパク質はサブユニットあたり1つの亜鉛イオンを結合し、亜鉛の配位はその構造的完全性にとって重要であると考えられます。
• MGMTはホスホタンパク質として分類されていることから示唆されるように、リン酸化によって調節されています。
• MGMTに関連するキーワードには、DNA損傷、DNA修復、メチルトランスフェラーゼ、トランスフェラーゼ、金属結合、およびリファレンスプロテオームが含まれ、ゲノム安定性の維持におけるその確立された役割を強調しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• このラビットモノクローナル抗体は、ヒトMGMTのアミノ酸108–207にまたがるペプチド抗原を用いて作成されました。還元条件下でのウェスタンブロットにおいて、約22 kDaのバンドを検出することが期待されます。
• ウェスタンブロットを行う際は、MGMTを発現することが知られているヒト細胞溶解液（HeLa、HEK293など）をポジティブコントロールとして含めることを検討してください。ローディングコントロールも並行して実行する必要があります。
• ELISAアプリケーションの場合、この抗体はキャプチャーまたは検出試薬として使用できます。間接法またはサンドイッチELISAフォーマットを最適化することができます。コーティング抗原がエピトープを適切に提示していることを確認してください。
• MGMTの発現はヒトの組織や細胞株によって異なる可能性があるため、実験系で抗体を検証し、反応性と特異性を確認してください。
• この抗体はヒトへの反応性について検証されています。他の種との交差反応性はテストされていないため、非ヒトモデルでの性能は保証されません。

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