WB、ELISA用抗MLH1モノクローナル抗体（KOバリデート済） - P40692

主な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：DNAミスマッチ修復タンパク質Mlh1の機能と局在

• MLH1はDNAミスマッチ修復タンパク質Mlh1（MutLタンパク質ホモログ1）をコードし、複製後DNAミスマッチ修復（MMR）システムの重要な構成要素です。FCC2、COCA2、HNPCCなど複数の別名でも知られています。
• MLH1はPMS2とヘテロ二量体を形成しMutLアルファを生成します。MutSアルファ（MSH2-MSH6）またはMutSベータ（MSH2-MSH3）によってミスマッチが認識されると、MutLアルファがヘテロ二重鎖に動員されます。RFCおよびPCNAの存在下でPMS2のエンドヌクレアーゼ活性を活性化し、ミスマッチ近傍に一本鎖切断を導入することで、EXO1による鎖特異的分解を促進します。
• MLH1はMLH3（MutLガンマ）ともヘテロ二量体を形成し、減数分裂組換えに関与します。
• 本タンパク質は核に局在し染色体と結合することから、DNA修復およびゲノム完全性の維持に寄与していることと一致しています。
• 発現は幅広い組織に認められ、結腸、リンパ球、乳腺、肺、脾臓、精巣、前立腺、甲状腺、胆嚢、心臓で高い発現レベルが検出されています。
• 翻訳後修飾としてアセチル化、リン酸化、ユビキチン化があります。MLH1はDNA損傷シグナル伝達に関与し、重度のDNA損傷後に細胞周期停止またはアポトーシスを誘導することができます。腫瘍抑制因子として分類されており、MLH1の変異は遺伝性非ポリポーシス大腸がん（HNPCC）と関連しています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 使用している免疫原は組換えヒトMLH1タンパク質であるため、天然型および変性型を認識する抗体が得られる可能性があります。ウェスタンブロッティングでは、ヒト細胞または組織溶解液において約85 kDaの位置に特異的バンドが検出されることが予想されます。抗体の特異性を確認するために、ノックアウト（KO）バリデート済コントロールサンプルを使用することを推奨します。
• ELISA用途では、本抗体を抗原捕捉または検出に使用することができます。サンドイッチELISA開発のためには、異なるエピトープを標的とする別のクローンとペアリングすることを検討してください。定量には組換えMLH1タンパク質を標準として使用してください。
• MLH1は核に局在するため、全細胞溶解液を使用してWBで検出する場合、適切な核抽出プロトコルを用いることで検出感度が向上する可能性があります。

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