WB、IF/ICC、IHC-P、ELISA用抗MLKLウサギモノクローナル抗体 - Q8NB16

製品コア仕様およびパラメータ

生物学的背景：MLKLの機能と局在

• MLKLは固有のタンパク質キナーゼ活性を欠くシュードキナーゼであり、TNF誘発性ネクロプトーシス細胞死の重要な実行因子として機能します。 関連文献: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439

• RIPK3によるリン酸化後、MLKLはホモ三量体化を起こして原形質膜に移行し、カルシウム流入と原形質膜の破壊を引き起こします。これらはネクロプトーシスの特徴的な現象です。 関連文献: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439

• 細胞質でのネクロプトーシスに加え、MLKLはオルトミクソウイルス感染時に核内ネクロプトーシスを促進することもあります。ZBP1はウイルスのZ-RNAを感知して核内のRIPK3を活性化し、MLKLのリン酸化、核膜の破壊、DNAの細胞質への漏出を引き起こします（類似性に基づく）。

• MLKLがイノシトール六リン酸（InsP6）に結合することは、そのネクロプトーシス機能に必須であり、ホスホイノシタイドシグナル伝達を細胞死の実行に結びつけます。 関連文献: PMID:29883610

• 亜細胞レベルでは、MLKLは主に細胞質に存在しますが、活性化に伴って細胞膜と核に移行します。これは膜および核膜破壊における二重の役割と一致しています。

• タンパク質はN末端のコイルドコイルドメインとC末端のシュードキナーゼドメインを含み、選択的スプライシングを受けてアイソフォームを生成します。これらのアイソフォームはネクロプトーシスを調節するか、未知の機能を持つ可能性があります。

• 翻訳後修飾、特にRIPK3を介したリン酸化は、MLKLの活性化、オリゴマー化、膜への局在化に極めて重要です。その他の修飾や相互作用によって活性が微調整される可能性があります。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 使用されている免疫原は、ヒトMLKL（NP_689862.1）のC末端シュードキナーゼドメイン内のアミノ酸369～471番にわたっています。この領域は全長タンパク質と、このセグメントを含む任意のアイソフォームの両方を認識すると考えられます。ご使用のモデル系では、RNAiまたはノックアウト対照により特異性を確認してください。

• ウェスタンブロットでは、ヒトMLKLとして54kDa付近にバンドが予想されます。最適な希釈倍率は、ネクロプトーシス誘導細胞溶解液（例：TNF-α + Smac模倣薬 + z-VAD-fmk処理）を陽性対照として用い、経験的に決定する必要があります。

• IF/ICCおよびIHC-Pの用途では、試料の種類に応じて最適化された抗原賦活と透過処理が必要となる場合があります。ネクロプトーシス刺激によりMLKLが原形質膜に集積するため、動的な局在対照として利用できます。

• ELISAプロトコルは組換えMLKLタンパク質または細胞溶解液を用いて開発できます。サンドイッチELISAでは対になる抗体セットを使用することで感度が向上します。

• ヒトおよびマウスに対して交差反応性が報告されていますが、大規模研究を開始する前に、対象の種および組織での検証を推奨します。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

CamelBioはIVD原料調達の統合パートナーです。検証済みの抗体ペア、最適化されたモノクローナル/ポリクローナル抗体、大量の補助試薬、希少標的の調達を提供し、構想から臨床までの診断薬開発を支援します。ネクロプトーシスおよび細胞死研究において、弊社は抗MLKL抗体と相補的試薬の安定供給を提供し、アッセイ開発とバイオマーカー探索を加速します。