ウエスタンブロット、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗MMP14/MT1-MMP ウサギポリクローナル抗体 - P50281

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：MMP14/MT1-MMPの機能と局在

• マトリックスメタロプロテアーゼ-14（MMP14）、別名MT1-MMPは、活性化にプロテアーゼによる切断を必要とする酵素前駆体として合成される膜型メタロプロテアーゼです。特徴的なジスルフィド結合、カルシウムおよび亜鉛結合部位を含み、リン酸化によって調節されます。
• エンドペプチダーゼとして、MMP14は様々な細胞外マトリックス成分、特にコラーゲンを分解し、細胞周囲のコラーゲン分解と結合組織のリモデリングに必須です（PubMed:8015608）。
  関連参考文献：
  PMID:8015608
• MMP14はプロテアーゼによる切断によってプロ・ゼラチナーゼA（プロ-MMP2）を活性化し、細胞増殖と遊走の正の調節因子として機能します。また、プロ-MMP2と共に線維血管組織の形成にも寄与します（PubMed:22065321, PubMed:12714657）。
  関連参考文献：
  PMID:22065321
  PMID:12714657
• この酵素は、リガンドDLL1の切断と阻害を介してNotchシグナル伝達の調節因子として働きます（PubMed:21572390）。
  関連参考文献：
  PMID:21572390
• MMP14はADGRB1を切断して血管新生阻害因子であるバスキュロスタチン-40を遊離し、またGDF15受容体GFRALを切断・不活性化して、GDF15-GFRALによる嫌悪反応を調節します（PubMed:22330140, PubMed:35177851）。
  関連参考文献：
  PMID:22330140
  PMID:35177851
• 局在は主に細胞膜ですが、MMP14はメラノソームや細胞質でも検出され、これは細胞周囲のプロテオリシスおよび細胞内シグナル伝達におけるその役割と一致しています。
• 発現は、結腸、乳房、頭頸部の間質細胞、および肺腫瘍で顕著であり、腫瘍微小環境リモデリングにおけるその機能と合致しています。

実験ガイドラインと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトMMP14の細胞外ドメイン内のアミノ酸75–174にマッピングされる合成ペプチドであり、この領域はヒト、マウス、ラット間で保存されており、報告されている交差性と一致します。
• ウエスタンブロッティングでは、酵素前駆体は約66 kDa付近にバンドを示します。活性化された処理済みの形態は、より低い分子量で現れる可能性があります。関連する細胞または組織ライセート（例：HT-1080線維肉腫細胞、胎盤組織）を使用してバンドパターンを検証してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化が必要な場合があります。結腸、乳房、または肺腫瘍サンプルのパラフィン包埋切片でテストしてください。間質の染色が期待されます。
• 免疫蛍光法（IF/ICC）では、細胞質および膜のMMP14を検出するために透過処理が必要です。適切なアイソタイプコントロールを使用してください。
• ELISAアプリケーションでは、異なるエピトープに対する捕捉抗体とのペアリングを検討してください。この抗体のポリクローナル性は、検出抗体として使用した場合に強力なシグナルをもたらす可能性があります。
• すべてのポリクローナル抗体と同様に、意図したアッセイシステムにおいてロット間の一貫性を確認する必要があります。

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