フローサイトメトリー用抗マウスCD4モノクローナル抗体（APC/Cyanine7）- P06332

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD4の機能と局在

• T細胞表面糖タンパク質CD4をコードするCd4遺伝子は、4つの細胞外免疫グロブリン様ドメイン、膜貫通ヘリックス、短い細胞質テールを持つ1回膜貫通型I膜タンパク質を産生します。L3T4またはLy-4としても知られるマウスタンパク質は、この構造を共有し、適応免疫において中心的な役割を果たします。
• CD4はMHCクラスII分子の共受容体として機能します。Tヘルパー細胞上では、T細胞受容体（TCR）が認識するものと同じMHC-ペプチド複合体に結合し、相互作用全体の親和性を高め、T細胞の活性化を促進します。
• MHCへの結合後、CD4はSrcファミリーキナーゼであるLCKをTCR-CD3複合体へリクルートします。これによりリン酸化カスケードが開始され、リンフォカインの産生、T細胞の運動性、接着、ならびにTヘルパー細胞の完全な活性化へとつながります。
• CD4は、胸腺におけるTヘルパー細胞の発生および単球の機能的マクロファージへの分化に必須です。また、マクロファージ、樹状細胞、NK細胞における活性化やサイトカイン発現にも関与し、多くの場合、TCR/LCK非依存的に機能します。
• 細胞内局在として、CD4は主に細胞膜に存在し、そこで脂質ラフトと結合します。また、パルミトイル化、N結合型糖鎖付加、リン酸化などの翻訳後修飾を受けます。これらの修飾は、膜局在とシグナル伝達機能を調節します。
• マウスにおける組織特異性：Tヘルパー細胞で高発現し、マクロファージ、樹状細胞、NK細胞にも低レベルで発現します。その発現はTヘルパー細胞系譜の特徴です。
• このタンパク質は免疫グロブリンスーパーファミリーの一員であり、複数のジスルフィド結合を含みます。これらの特徴は、構造の安定性とリガンドとの相互作用能に寄与します。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原が組換えタンパク質であるため、この抗体は線状エピトープを認識する可能性があります。抗原賦活化処理や変性ウエスタンブロッティングを行う際には、この点を考慮してください。ただし、本抗体は非変性条件でのフローサイトメトリーに推奨されます。
• フローサイトメトリーでは、細胞集団に対する最適濃度を決定するために抗体を滴定してください。また、APC/Cyanine7蛍光を使用する場合は、適切なアイソタイプコントロールと単色補正コントロールを含めてください。
• リンパ系器官（脾臓、リンパ節、胸腺）または末梢血から単細胞懸濁液を調製し、染色前にFc受容体をブロックして非特異的結合を最小限に抑えてください。
• 関連するマウス系統および組織で発現を検証してください。CD4はTヘルパー細胞で高発現しますが、マクロファージ、樹状細胞、NK細胞の一部のサブセットでも検出される可能性があります。

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