抗マウスCD45モノクローナル抗体 () for IF/ICC, FC - P06800

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD45の機能と局在

• CD45（白血球共通抗原（L-CA）、Ly-5、T200としても知られる）は、マウスのPtprc遺伝子によってコードされる受容体型チロシンタンパク質ホスファターゼCです。
• T細胞の活性化に不可欠です。抗原受容体の結合時に、CD45はDPP4結合を介して共活性化を正に調節します。
• このタンパク質は、2つの連続した細胞内ホスファターゼドメインを含みます。最初のドメインは触媒活性を持ち、2番目のドメインは基質特異性を調節します（類似性による）。
• CD45は、SKAP1、FYN、およびLYNを含む重要なシグナル伝達分子を脱リン酸化し、それによってLYN活性および下流のTCRシグナル伝達を調節します。
• 免疫学的シナプスにおいて、CD45は膜ラフトに局在し、樹状細胞上のCLEC10Aと相互作用して、T細胞活性化の閾値を微調整し、自己免疫を防ぎます。
• 代替スプライシングにより複数のCD45アイソフォームが存在し、分子量は130〜144 kDaの範囲です。このタンパク質は高度にグリコシル化およびリン酸化されています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫蛍光（IF/ICC）の場合：固定および透過処理の条件はエピトープのアクセシビリティに影響を与える可能性があるため、メタノール固定とパラホルムアルデヒド固定のプロトコルを比較検討してください。
• 免疫原は細胞外ドメインの大部分（aa 26–566）に及んでいるため、複数のCD45アイソフォームを認識する可能性があります。必要に応じて、実験環境でアイソフォーム特異性を検証してください。
• フローサイトメトリー（FC）の場合：最適な染色濃度を決定するために抗体を滴定し、常に適切なアイソタイプ対照を含めてください。
• CD45はすべての白血球に広く発現しているため、リンパ組織では広範囲な染色が予想されます。正確な細胞集団のゲーティングには、系統特異的マーカーを使用してください。

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