Monoclonal Antibodies
WB、IHC-P、FC、ELISA用 抗マウスIgM モノクローナル抗体 - P01872
商品番号 : CM0009351
価格は以下に基づいて変動します 仕様とカスタマイズ
- アプリケーション
- WB、IHC-P、FC、ELISA
- 交差反応性
- マウス
- タンパク質分子量
- 50kDa/53kD
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製品の主要仕様とパラメータ
| パラメータ | 値 |
|---|---|
| 製品名 | マウスIgM ウサギmAb |
| 備考/別名 | Igm; muH; Igh6; Igh-6; Igh-M |
| 種特異性 | マウス |
| 免疫原 | マウスIghm(P01872)のアミノ酸105-454に対応する配列を含む組換え融合タンパク質。 |
| 抗体産生宿主 | ウサギ |
| カテゴリー | モノクローナル抗体 |
| 適用方法 | WB, IHC-P, FC, ELISA |
| 交差反応性 | マウス |
| SWISS | P01872 |
| タンパク質分子量 | 50kDa/53kD |
| 発送条件 | 保冷剤(氷袋) |
生物学的背景:IgM重鎖定常領域の機能と局在
- タンパク質の同一性とアイソフォーム: 標的は免疫グロブリン重鎖定常領域μ(Ig μ鎖)であり、Ighm遺伝子(別名Igh-6)によってコードされる。IgM抗体の定常領域を構成し、選択的スプライシングにより分泌型(sIgM)と膜結合型(mIgM)のアイソフォームが存在する。
- 抗原結合と可変ドメインの組み立て: 液性免疫において、1本の重鎖と1本の軽鎖の可変ドメインが抗原結合部位を形成する。これらのドメインはV-(D)-J再構成によって組み立てられ、抗原曝露後、親和性成熟のために体細胞超変異を受ける(類似性による)。
- 分泌型IgMの多量体化と多反応性: sIgMは五量体または六量体に多量体化し、高い親和性での抗原結合を可能にする。自然sIgMは多反応性であり、保存された自己および病原体由来の構造を認識するのに対し、免疫sIgMは抗原特異的である。両者は効率的な液性免疫応答に不可欠である。関連文献: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
- Fc受容体と補体を介したエフェクター機能: sIgMのエフェクター機能は、リンパ系細胞上の高親和性Fc受容体FCMRを介して(IgG応答と自己寛容を促進)、およびC1qをリクルートして古典的補体経路を活性化すること(病原体の中和とアポトーシス細胞の貪食を促進)によって媒介される。関連文献: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
- 粘膜免疫とトランスサイトーシス: 粘膜表面では、sIgMはPIGRによって上皮を越えて輸送され、分泌成分と共に分泌される。IgM-抗原複合体は、FCMRを介してM細胞を越えてリンパ組織へ逆行性トランスサイトーシスされる可能性がある。関連文献: PMID:34788614
- 膜結合型IgM BCRシグナル伝達: B細胞受容体複合体の一部として、膜結合型IgMはB細胞の生存に必要な構成的トーニックシグナルを提供し、免疫グロブリン遺伝子の再構成と対立遺伝子排除を調節するpre-BCRシグナル伝達を媒介する。
- 細胞内局在と組織発現: このタンパク質は細胞膜上(BCR構成要素として)に存在し、また分泌される。タンパク質レベルでは、骨髄およびB-1細胞とB-2細胞で発現している。
- 翻訳後修飾と構造キーワード: ジスルフィド結合、N結合型グリコシル化、免疫グロブリンドメイン、および膜貫通ヘリックス(膜結合型アイソフォームにおいて)が特徴である。キーワード:ジスルフィド結合、糖タンパク質、免疫グロブリンドメイン、膜、分泌型、膜貫通型。
実験ガイダンスと技術的ヒント
- 使用した免疫原は、マウスIghm(P01872)のアミノ酸105-454にまたがる組換え融合タンパク質であり、定常ドメイン内の領域に対応する。この設計は、分泌型と膜結合型の両アイソフォーム間で保存されたエピトープを標的とする可能性があり、両方の形態の検出を可能にするかもしれない。
- ウエスタンブロッティング(WB)では、還元条件下での標的の予測分子量は約50–53 kDaである。マウス脾臓ライセートや精製IgMなどの適切な対照の使用、およびサンプルシステムでのバンドパターンの検証を検討すること。
- パラフィン包埋組織の免疫組織化学(IHC-P)では、最適な抗原賦活化と抗体希釈率を実験的に決定する必要がある。本抗体はマウス組織での使用を意図しており、他の種との交差反応性は報告されていない。
- フローサイトメトリー(FC)では、適切なFc受容体ブロッキングを確実に行い、ウサギモノクローナル抗体形式と互換性のある直接標識または二次検出試薬を使用すること。マウスBリンパ球集団(例:脾臓細胞)での染色の事前検証を推奨する。
- ELISAアプリケーションでは、本抗体はマウスIgMの捕捉または検出に使用できる。サンドイッチELISAの構築には適切な検出抗体との組み合わせを検討し、アッセイの感度と特異性を検証すること。
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