フローサイトメトリー（細胞内）用抗マウスKi67モノクローナル抗体（）- E9PVX6

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：Ki67の機能と局在

• Mki67遺伝子にコードされるKi67は、分子量約351kDa（UniProtより350864 Da）の大型の増殖マーカータンパク質で、分裂期染色体と結合します。有糸分裂前期には染色体反発因子として、後期には染色体誘引因子として働き、染色体の適切な分散とクラスター化を保証します（PubMed:27362226）。関連文献： PMID:27362226
• 有糸分裂前期に、Ki67は核小体から染色体表面へと局在を変え、伸長したブラシ状構造を形成します。この構造は立体的・静電的なバリアを提供し、界面活性剤として作用して染色体の凝集を防ぎ、個々の染色体の独立した運動を可能にします（PubMed:27362226）。関連文献： PMID:27362226
• 後期にはKi67の脱リン酸化と保存された塩基性パッチの露出により、染色体表面でRNA依存性の液-液相分離が引き起こされ、染色体のクラスター化が促進されて核の再構築が容易になります。この相転移により、Ki67は反発剤から誘引剤へと機能が切り替わります。
• Ki67は超らせん構造かつATリッチなDNAを優先的に結合し、後期には未成熟リボソームRNAにも結合します。この結合が相分離に寄与します。ただし、分裂期染色体の内部構造には寄与しません（PubMed:26949251）。関連文献： PMID:26949251
• 亜細胞レベルでは、間期にはKi67は核小体に局在し、有糸分裂時には染色体表面へと移行します。主に増殖細胞で発現され、細胞周期活性化の信頼できるマーカーとして機能します。
• 翻訳後修飾にはアセチル化、リン酸化、ユビキチン化が含まれ、これらがKi67の分裂期機能と動的な局在を制御しています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 細胞内フローサイトメトリーでは、メタノールまたはサポニンを用いたバッファーなど、核抗原に適した透過処理法を使用し、核小体および染色体上のKi67に抗体が到達できるようにしてください。
• 最適な染色濃度を細胞種ごとのプロトコルで決定するため、細胞10^6個あたり0.1～1 µgの範囲で抗体の滴定を行ってください。
• 染色特異性を検証するため、NIH/3T3、CTLL-2などの増殖中のマウス細胞株や刺激した初代リンパ球などの陽性コントロールと、アイソタイプコントロールや静止細胞などの陰性コントロールを必ず設定してください。
• Ki67の分布を維持するため、細胞は速やかに固定してください。長期保存するとエピトープの完全性が損なわれる可能性があります。一般的にはパラホルムアルデヒド固定後に透過処理を行う方法が用いられています。
• 結合体は標準的な赤色レーザー（633～647 nm）での検出に対応しています。多重染色を行う場合は、適切なフィルターセットを使用し、補正を最小限に抑えてください。

CamelBioについて：ワンストップソーシングの架け橋

CamelBioはIVD原料調達の専門パートナーであり、構想段階から臨床段階まで包括的なポートフォリオを提供しています。本抗Ki67抗体は、細胞増殖および腫瘍マーカーのラインナップの一部です。検証済み抗体ペア、最適化された組換えタンパク質、補助試薬の供給体制が整っています。診断開発のための大量のモノクローナル抗体が必要な場合でも、カスタマイズされた原料ソリューションが必要な場合でも、CamelBioまでお問い合わせください。信頼性の高いワンストップサポートを提供いたします。