WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗MSH6ウサギモノクローナル抗体 - P52701

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：MSH6の機能と局在

• G/Tミスマッチ結合タンパク質（GTBP）またはp160としても知られるDNAミスマッチ修復タンパク質Msh6は、複製後DNAミスマッチ修復（MMR）系の構成要素です。
• MSH2とヘテロ二量体を形成してMutSα複合体を構成し、DNA中の単一塩基ミスマッチおよびジヌクレオチド挿入・欠失ループ（IDL）を認識します。結合時には二重らせんを湾曲させ、約20塩基対を保護します。
• ミスマッチを認識すると、MutSαはMutLαをリクルートして三者複合体を形成し、鎖識別、切除、再合成などの下流の修復イベントを開始します。
• ATPの結合と加水分解は分子スイッチとして機能します。ミスマッチDNAによってADPからATPへの交換が誘導され、MutSαはDNA上を拡散するスライディングクランプへと変換されます。この過程はミスマッチ修復に不可欠です。
• PWWPドメインを介してG1期およびS期初期のクロマチンにリクルートされます。このドメインはLys36がトリメチル化されたヒストンH3（H3K36me3）に特異的に結合し、複製起点の早期マーキングを可能にします。
• 核および染色体に局在します。MSH6の変異は、遺伝性非ポリポーシス大腸がん（HNPCC／リンチ症候群）およびその他の疾患バリアントと関連しています。
• DNA損傷、DNA修復、DNA結合、ATP結合、ヌクレオチド結合、宿主・ウイルス相互作用、選択的スプライシングなどのキーワードが付与されており、多様な制御機能を担うことを反映しています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はN末端由来の合成ペプチドであるため、WB用のHeLaまたはMCF7細胞ライセートなど、全長MSH6を発現する系で検証し、抗体がネイティブタンパク質を認識することを確認してください。
• IHC-Pでは、抗原賦活化条件（例：クエン酸緩衝液 pH 6.0またはEDTA pH 9.0）を最適化してください。また、MSH6は核に局在するため、ヒト大腸腺がんまたは扁桃組織を陽性対照として染色を評価することを検討してください。
• IF/ICCでは、核抗原にアクセスできるよう細胞を十分に透過処理し、局在を確認するために核マーカーとの共染色を検討してください。
• ELISAでは、重複しないエピトープを認識するペア抗体が必要になる場合があります。組換えMSH6タンパク質またはペプチド競合アッセイを用いて検証してください。
• MSH6は大きなタンパク質（153 kDa）であるため、WBでは適切なゲル濃度（例：6～8% SDS-PAGE）を使用し、転写時間を長めに設定してください。

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