WB用抗ミエリン塩基性タンパク質マウスモノクローナル抗体 - P02686

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：ミエリン塩基性タンパク質の機能と局在

• ミエリン塩基性タンパク質（MBP）は、中枢神経系（CNS）のミエリン膜に最も豊富に存在するタンパク質の一つであり、ミエリン鞘の形成と安定化において重要な役割を果たします。
• MBPの古典的なアイソフォーム群（アイソフォーム4～14）はミエリン構造に不可欠であり、より小型のアイソフォームは多発性硬化症などの病態における再ミエリン化に寄与する可能性があります。
• MBP遺伝子の選択的スプライシングにより、幅広いアイソフォームが産生されます。その中には、脳の初期発生およびT細胞シグナル伝達に機能する非古典的なGolli-MBP（アイソフォーム1～3）も含まれます。
• アセチル化、シトルリン化、メチル化、リン酸化などの翻訳後修飾により、多様なMBPバリアントが生じ、それぞれが特異的な機能を持つ可能性があります。
• MBPはミエリン膜および核に局在し、アイソフォームごとに異なる細胞内分布を示します。
• 組織発現には差異があります。古典的なMBPアイソフォームは中枢神経系および末梢神経系に存在する一方、Golli-MBPアイソフォームは胎児胸腺、脾臓、免疫細胞で発現します。
• MBPは自己免疫性脳脊髄炎に関与することが示されており、T細胞の増殖を誘導し、多発性硬化症における主要な自己抗原となります。

実験に関する指針と技術的ヒント

• 免疫原にはヒトMBPのアミノ酸1～304（全長の古典的アイソフォーム）が含まれているため、本抗体は多くのMBPアイソフォームに共通する保存された線状エピトープを認識すると考えられます。
• ウェスタンブロット（WB）では、33 kDa付近にバンドが検出されると予想されます。ただし、選択的スプライシングと翻訳後修飾が広範に生じるため、特に脳ライセートでは複数のバンドまたはスメアが現れる場合があります。
• 免疫組織化学染色（IHC-P）および免疫蛍光染色（IF-P）では、脳および脊髄の有髄領域が強く染色されるはずです。適切な抗原賦活化法を用いたパラフィン包埋切片または凍結切片の使用を推奨します。
• ELISAでは、組換えMBPまたは脳組織から精製した天然MBPを用いて抗体を評価できます。MBP定量用のサンドイッチELISAを構築するため、検出抗体とのペアリングを検討してください。
• MBPは哺乳類間で高度に保存されているため、マウスおよびラットとの交差反応性が予想され、神経炎症および脱髄のげっ歯類モデルに適しています。
• 特異性を確認するため、必ず陽性対照（例：ヒト脳ライセート）および陰性対照（例：非神経組織）を含め、各アッセイにおける抗体希釈倍率を最適化してください。

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