抗ミエロペルオキシダーゼ (Mpo) ウサギポリクローナル抗体 (WB、IF-P、IHC-P、ELISA用) - P11247

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景: ミエロペルオキシダーゼ (Mpo) の機能と局在

• ミエロペルオキシダーゼ (Mpo) は、ヘムと鉄を含むペルオキシダーゼであり、好中球のアズール顆粒に高発現し、ジスルフィド結合で連結されたグリコシル化された重鎖と軽鎖のホモ二量体として機能します。
• 自然免疫の主要なエフェクターとして、Mpoは過酸化水素と塩化物イオンを強力な殺菌性酸化剤である次亜塩素酸 (HOCl) に変換する反応を触媒します。
  関連参考文献: PMID:11593004
• Mpoは、好中球細胞外トラップ (NETs) の形成において中心的な役割を果たします。この過程では、Mpoは核に移行し、ヌクレオソームを破壊し、クロマチンの脱凝縮を促進して病原体を捕捉する細胞外DNAウェブを形成します。
  関連参考文献: PMID:10085024, PMID:23306200
• Mpoの直接的な殺菌活性は、様々な基質を酸化して次亜臭素酸、二酸化窒素ラジカル、チロシンタンパク質ラジカルなどの追加の反応性種を生成する能力によって増幅されます。
• Mpoは多コンパートメントタンパク質です：細胞質アズール顆粒に貯蔵され、感染時にファゴソームに移行し、能動的に分泌されます；NETosis時には、核と染色体に局在します。
• この酵素の活性はカルシウム依存性であり、その成熟型は鎖内ジスルフィド結合によって安定化され、正しいフォールディングと活性に重要なN-グリコシル化を含む翻訳後修飾を受けます。
• さらに、Mpoは、アポリポタンパク質A-Iなどの宿主タンパク質を塩素化およびニトロ化することにより、コレステロール流出を損ない、動脈硬化を促進することで、炎症性組織損傷に寄与します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原であるマウスMpoのアミノ酸16–718にわたる組換えタンパク質は、シグナルペプチドを除くほぼ全長の前駆体配列をカバーしており、この抗体がプロ酵素および処理済みの重鎖/軽鎖の両方を認識する可能性を示唆しています。
• ウェスタンブロッティングでは、前駆体の予測分子量は約81 kDaです。還元条件下では、サンプル処理と細胞タイプに応じて、重鎖（約60 kDa）と軽鎖（約15 kDa）も検出される可能性があります。
• 免疫蛍光法および免疫組織化学法では、アズール顆粒（細胞質）、ファゴソーム、または核局在が起こるNETosis時のMpoを検出するために、透過化処理と抗原賦活化プロトコルの最適化を検討してください。
• この抗体はELISA用に検証されています。適切なコーティング条件を確保し、バックグラウンドを最小限に抑えるために適切なブロッキングおよび洗浄ステップを含めてください。
• ヒトおよびラットMpoとの交差反応性は実証されていますが、シグナル強度は異なる場合があります。関連する種および組織コンテキストで希釈系列を検証してください。

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