WB、IF/ICC、ELISA用抗NAGAウサギポリクローナル抗体 - P17050

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：アルファ-N-アセチルガラクトサミニダーゼ（NAGA）の機能と局在

• NAGAは、リソソーム性グリコシダーゼであるアルファ-N-アセチルガラクトサミニダーゼ（別名アルファガラクトシダーゼB）をコードします。
• 糖脂質およびグリコペプチドから末端アルファ-N-アセチルガラクトサミン残基を除去する反応を触媒し、糖脂質の異化作用に必須です。
• この酵素はリソソームに局在し、糖複合体の分解に関与しています。
• UniProtのキーワードに示されている通り、翻訳後修飾としてN-グリコシル化（糖タンパク質）、リン酸化（リン酸化タンパク質）が生じており、シグナルペプチドとジスルフィド結合を持っています。
• 「疾患バリアント」のキーワードに記載されている通り、NAGAの変異は疾患と関連しています。表現型は個体によって異なる場合がありますが、関連するキーワードの1つにてんかんが挙げられています。
• 計算上のタンパク質分子量は約46.6 kDa（UniProt）ですが、本抗体製品は47 kDaのバンドを標的としており、グリコシル化された成熟型と一致しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトNAGA（NP_000253.1）のC末端付近にあるアミノ酸312～411に対応する組換え断片を用いて設計されています。この領域は表面に露出している可能性が高く、天然型と変性型の両方のタンパク質を認識できる可能性があります。
• ウエスタンブロット（WB）では47 kDa付近にバンドが検出されることが予想されます。リソソームを多く含むサンプルなど、NAGAの発現が知られている組織や細胞から調製した溶解物を陽性コントロールとして使用することを推奨します。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学（IF/ICC）では、リソソームマーカーとの共染色を行うことで、リソソーム局在を確認することを推奨します。
• マウスおよびラットサンプルとの交差反応性を持つことから、エピトープが保存されていることが示唆されます。ただし、定量的な種間比較を行う場合は、配列アライメントによってエピトープの保存性を確認することを推奨します。
• ELISA用途では、定量精度を確保するためにコーティング条件を最適化し、標準曲線として組換えNAGAタンパク質またはペプチドを使用してください。

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