WB、ELISA用抗NEK7ウサギモノクローナル抗体 - Q8TDX7

主な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：NEK7の機能と局在

• NEK7（NIMA-related kinase 7）はセリン/スレオニンプロテインキナーゼであり、中心小体微小管核形成、有糸分裂紡錘体形成、細胞質分裂を含む有糸分裂細胞周期の進行に必須の役割を果たしています。

関連文献: PMID:17101132 PMID:19941817 PMID:17586473 PMID:19414596

• EML4のSer-146などの下流標的をリン酸化し、微小管からの解離を促進して効率的な染色体整列を可能にするほか、RPS6KB1もリン酸化します。

関連文献: PMID:31409757

• 有糸分裂以外にも、NEK7はNLRP3インフラマソームの重要な活性化因子として機能し、キナーゼ活性とは独立して微小管形成中心（MTOC）でNLRP3を活性化しCASP1の活性化を可能にします。

関連文献: PMID:26642356 PMID:31189953 PMID:36442502 PMID:39173637

• NEK7とNEK9の相互作用は、インフラマソーム活性化と細胞分裂の間の相反性を強化し、細胞性スイッチとして作用します。

関連文献: PMID:26642356 PMID:31189953

• 亜細胞レベルでは、NEK7は核、細胞質、紡錘極、中心小体、MTOCに局在します。

• 肺、筋肉、精巣、脳、心臓、肝臓、白血球、脾臓で高発現しており、卵巣、前立腺、腎臓では発現が低く、小腸には発現が認められません。

• 主要な構造・調節特徴として、ATP結合キナーゼドメイン、金属結合部位、アセチル化やリン酸化などの翻訳後修飾が存在します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトNEK7の保存領域（アミノ酸203-302番）をカバーしており、配列相同性が高いため、ヒト、マウス、ラットのサンプルを用いたWBで約35 kDaの内在性タンパク質を検出できると予想されます。
• WBについては、陽性コントロールとしてHeLa、HEK293T、Jurkatなどの一般的な細胞株の全細胞溶解物を使用し、特異的なノックダウンまたはノックアウトサンプルで検証してバンドの同定を確認することを推奨します。
• ELISAについては、組換えNEK7タンパク質またはペプチドをコーティング抗原として使用できます。ご使用のアッセイ系における最適な作動濃度を決定するために、抗体の滴定を行ってください。
• インフラマソーム関連経路を研究する際は、LPSプライミング＋ナイジェリシンなどの適切な活性化処理を実施してNEK7の役割を評価してください。NLRP3活性化におけるNEK7の機能はキナーゼ非依存的であることにご留意ください。
• NEK7は核および細胞質に局在するため、検出前に亜細胞分画法を用いて特定の区画を濃縮することができます。

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