WB、IF/ICC、ELISA用抗ネスプリン1モノクローナル抗体 - Q8NF91

製品の主要仕様・パラメータ

生物学的背景：Nesprin 1の機能と局在

• Nesprin-1（SYNE1、エナプチン、MYNE1、KASH1としても知られる）は複数のアイソフォームを持つモジュラータンパク質で、オルガネラとアクチン細胞骨格の間に連結ネットワークを形成し、細胞内の空間的構造を維持しています。
• LINC（Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton）複合体のコア成分として、核ラミナを細胞骨格に連結し、核膜を介した機械的力の伝達を媒介し、核の移動と位置決めを制御します。
• SUN1/2や細胞質のダイニン-ダイナクチンモーター複合体と共に、Nesprin-1は神経前駆細胞における核-中心体の接着と核遊走に関与すると考えられており、SYNE1とSYNE2は重複して機能します。
• 初期繊毛形成において中心体が頂端細胞表面に遊走するために必要であり、おそらくSUN3:SYNE1/KASH1 LINC複合体を介して、精子頭形成時の核リモデリングに寄与する可能性があります。
• 亜細胞局在は、核外膜、核膜、細胞質、細胞骨格、筋原線維の筋節、ゴルジ装置です。
• 広範に発現しており、骨格筋・平滑筋、心臓、脾臓、末梢血白血球、膵臓、小脳、胃、腎臓、胎盤で高い発現が認められます。アイソフォームGSRP-56は主に心臓と骨格筋で発現します。
• UniProtのキーワードに示される通り、主要な翻訳後修飾と構造的特徴として、選択的スプライシング、リン酸化、ジスルフィド結合形成があり、スペクトリンリピートと膜貫通ヘリックスを有しています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• ウエスタンブロッティングでは、Nesprin-1は複数のアイソフォームとして存在します。主要なアイソフォームは約1011 kDaの位置に泳動され、より小さいアイソフォームは112 kDa付近に出現することがあります。高分子量タンパク質が効率的に転写されるよう、適切なゲル濃度（例：4～6% SDS-PAGE）を使用し、転写時間を長めに設定してください。
• 免疫蛍光法/免疫細胞化学では、核膜、細胞質、場合によって細胞骨格構造で染色が予想されます。既知の亜細胞マーカーを用いて検証を行ってください。
• ELISAでは、組換え免疫原を参照標準として用い、抗原コーティングと抗体希釈を最適化してください。

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