WB、IF、IHC、ELISA用 抗ニューロフィラメントL モノクローナル抗体 - P07196

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: ニューロフィラメント軽鎖ポリペプチドの機能と局在

• ニューロフィラメント軽鎖ポリペプチド (NEFL) は中間径フィラメントファミリーの一員であり、NEFMおよびNEFHとともに神経細胞の太さと軸索構造を維持する3つの主要なニューロフィラメントタンパク質の一つです。
• NEFLは、ペリフェリン (PRPH) やアルファ-インターネキシン (INA) などの他の神経細胞中間径フィラメントタンパク質と協調して、神経細胞の完全性に不可欠なフィラメント状ネットワークを形成します。
• このタンパク質は主に軸索に発現し、神経細胞の細胞質および細胞骨格に局在し、軸索の放射状成長に重要な役割を果たします。
• 翻訳後修飾には、アセチル化、糖化、メチル化、リン酸化、ユビキチン化が含まれ、これらはフィラメントの集合、安定性、および他の細胞骨格成分との相互作用を調節します。
• NEFL遺伝子の変異は、シャルコー・マリー・トゥース病1F型および2E型を含む神経変性疾患と関連しており、軸索維持および神経障害への感受性におけるその役割を浮き彫りにしています。
• このタンパク質の分子量は約61.5 kDa (配列から計算) であり、翻訳後修飾によりSDS-PAGEでは68 kDaのバンドとして検出されることが多いです。
• NEFLは他のニューロフィラメントサブユニットとともに、多発性硬化症、アルツハイマー病、外傷性脳損傷などの状態における神経損傷のバイオマーカーとして機能します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトNEFLタンパク質の中心領域であるアミノ酸60-250に対応しているため、この抗体は保存されたエピトープを認識する可能性が高いです。非ヒト種に使用する場合は、反応性を確認するために配列アライメントを考慮してください。
• ウェスタンブロットでは、68 kDa付近のバンドが観察される可能性があります。予想される分子量と比較し、β-アクチンやGAPDHなどの適切なローディングコントロールを使用して検証してください。
• 免疫蛍光では、最適な固定および透過化条件をテストする必要があります。パラホルムアルデヒド固定後のTriton X-100による透過化は、ニューロフィラメント染色に一般的に使用されます。
• 免疫組織化学では、抗原賦活化法 (例: 熱処理によるクエン酸バッファー) が検出を向上させる可能性があります。陽性および陰性の組織対照を含めてください。
• ELISAでこの抗体を使用する場合は、他のニューロフィラメントサブユニットとの交差反応性を避けるために、コーティング抗原が免疫原領域と一致することを確認してください。

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