WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA、ChIP用 抗NF-kB p65/RelA モノクローナル抗体 - Q04206

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：NF-kB p65/RelAの機能と局在

• NF-kB p65サブユニット（別名RELA、NFKB3）は、ほぼすべての細胞種に存在する多機能転写因子複合体NF-カッパ-Bの中核構成要素です。
• NF-カッパ-B複合体は、REL様ドメインを含むタンパク質によって形成されるホモまたはヘテロ二量体です。RELAとNFKB1（p50）のヘテロ二量体は最も豊富な形態であり、転写活性化因子として機能します。
• RELA/p65は、標的遺伝子プロモーターのカッパ-B部位に結合することで、炎症および免疫応答、ならびに細胞分化、増殖、アポトーシス、腫瘍形成において中心的な役割を果たします。
• 未刺激細胞では、NF-カッパ-B二量体は阻害因子（I-カッパ-B）によって細胞質に保持されています。活性化されると、I-カッパ-Bはリン酸化され分解され、RELAが核に移行して遺伝子発現を調節できるようになります。
• RELAは、アセチル化、リン酸化、メチル化、S-ニトロソ化、ユビキチン化など、広範な翻訳後修飾を受け、その活性、安定性、相互作用を微調整します。
• 機能的研究により、RELAはT細胞におけるサイトカイン遺伝子発現に必須であることが示されています。 関連文献: PMID:15790681
• RELAは、SARS-CoV-2感染時のインターフェロン応答を調節する重要な転写因子として同定されています。 関連文献: PMID:33440148
• このタンパク質は主に核と細胞質に局在し、活性化状態に応じてこれらの区画間を動的にシャトルします。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ウェスタンブロット（WB）では、NF-kB p65の計算分子量と一致する約60 kDaの特異的バンドが期待されます。
• IHC-PおよびIF/ICCでは、関連する組織または細胞系での検証が推奨されます。パラフィン包埋切片では抗原賦活化が必要な場合があります。
• KO検証データは、内在性RELAに対する特異性を示しています。ユーザーは実験に適切な対照（例：ノックアウト細胞ライセート）を含めることをお勧めします。
• ChIPアッセイでは、この抗体はクロマチンに結合したネイティブなNF-kB p65を認識します。最適な固定および断片化条件は経験的に決定する必要があります。
• この抗体は複数のアプリケーションに記載されていますが、個々のアッセイ条件（例：希釈倍率、インキュベーション時間）はエンドユーザーの実験室で最適化する必要があります。

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