WB、IHC-P、ELISA用抗NF-κB2モノクローナル抗体 - Q00653

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：NF-κB2の機能と局在

• NF-κB2はp100サブユニットをコードし、タンパク質分解プロセシングを経て活性型DNA結合性p52サブユニットが生成されます。選択的スプライシングによりアイソフォームp49も産生されます。
• p100/p52はNF-κB転写因子ファミリーに属し、Rel様タンパク質（RELA、RELB、REL、NFKB1）とホモ二量体またはヘテロ二量体を形成し、遺伝子発現を制御します。
• 非古典的NF-κB経路では、RelBと結合したp100がIKKαによりリン酸化され、p52にプロセシングされることで、転写活性化複合体であるRelB-p52が核へ移行します。
• p52のホモ二量体は転写リプレッサーとして働く一方、RelB-p52ヘテロ二量体は転写を活性化し、免疫・炎症性遺伝子のプロモーター領域にあるカッパB部位（5'-GGRNNYYCC-3'）に結合します。
• NF-κB2は炎症、免疫、細胞増殖、分化、アポトーシスなど多様な生物学的プロセスに関与しています。
• RELBと協調し、CLOCK-BMAL1ヘテロ二量体の転写活性化作用を抑制することで、概日時計を制御しています。
• 亜細胞局在は、不活性型のp100/I-κB複合体として細胞質に、活性型のp52を含む二量体として核に存在します。
• Ank反復配列、イソペプチド結合、ubl結合（SUMO化）は翻訳後修飾であり、このタンパク質はリン酸化も受けます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はp100のC末端アンキリン反復ドメイン内のアミノ酸745～877番に対応しており、プロセシングされたp52サブユニットにはこの領域が存在しません。そのため、本抗体は全長p100（約97 kDa）を優先的に認識する可能性があります。必要に応じて、ご使用のモデル系でp100とp52の両方に対する反応性を検証することを推奨します。
• ウエスタンブロッティングでは、標準的なSDS-PAGEおよび転写条件を使用してください。p100は97 kDa付近にバンドが検出されます。低分子のバンドはプロセシング中間体または分解産物である可能性があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、組織中のNF-κB2の活性化状態に応じて、核染色と細胞質染色の両方が観察される場合があります。シグナル特異性を確認するため、適切なコントロールを設けてください。
• ELISAでは、組換えp100または細胞溶解液と組み合わせて使用できます。コーティングする抗原にC末端エピトープ領域が含まれていることを確認してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が確認されていることから、これらの種間で免疫原配列が保存されていることが示唆されますが、エピトープの同一性を確認するために配列アライメントを行うことを推奨します。

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