抗NFKB1ポリクローナル抗体（WB、IHC-P、IF/ICC、IP、ELISA用）- P19838

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：NFKB1の機能と局在

• NFKB1は、活性型p50サブユニットにプロセシングされるp105前駆体をコードしています。p105はNF-κBタンパク質の細胞質保持因子として機能し、一方p50はRELA/p65と共に活性型NF-κB複合体を構成します。 関連文献： PMID:1423592

• NF-κBは、炎症、免疫、細胞増殖、腫瘍形成、およびアポトーシスに関与する多面的な転写因子です。Rel様ドメイン含有タンパク質のホモ二量体またはヘテロ二量体として存在し、p65-p50ヘテロ二量体が最も一般的な形態です。

• NF-κB p65-p50複合体は、標的遺伝子のエンハンサー領域にあるκBコンセンサス配列 5'-GGRNNYYCC-3' に特異的に結合し、免疫応答および急性期応答を調節します。 関連文献： PMID:1740106, PMID:7830764

• NFKB1は細胞質と核の両方に局在し、不活性なNF-κB複合体はIκB阻害剤によって細胞質に保持されます。刺激を受けると、IκBがリン酸化および分解され、NF-κBの核内移行が可能になります。

• リン酸化、アセチル化、ユビキチン化などの翻訳後修飾がNF-κBの活性を調節します。

• p50-p50ホモ二量体は転写抑制因子として作用しますが、BCL3と結合すると活性化因子になることがあります。

• NFKB1は、MAP3K8と複合体を形成することでMAPKシグナル伝達の抑制にも関与しており、p105のプロテアソーム依存的な分解によって活性型MAP3K8が放出されます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はNFKB1のアミノ酸740-964に対応しており、これはp105のC末端領域に位置しています。そのため、この抗体はプロセシングされたp50サブユニットではなく、全長p105前駆体（約105 kDa）を検出することが予想されます。p105とp50を区別する実験を設計する際は、この点をご留意ください。
• ウェスタンブロットでは、約105 kDaの位置にバンドが検出されることが予想されます。ご使用のサンプルシステムに合わせて、ローディングコントロールと抗体希釈率を最適化してください。
• 免疫沈降（IP）では、非変性条件下で天然のNFKB1複合体を捕捉できるか検証してください。
• IHC-PおよびIF/ICCでは、NF-κBの活性化状態を反映させるため、基礎条件および刺激条件下での細胞内局在（細胞質対核）を確認してください。
• ELISAアプリケーションでは、適切な作業濃度を確立するために、組換え抗原または細胞ライセートに対する抗体の滴定が必要になる場合があります。

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