抗NLRC4ポリクローナル抗体（WB用） - Q3UP24

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：NLRC4の機能と局在

• NLRC4（NLRファミリーCARDドメイン含有タンパク質4）はIpaf、CARD12、CLANなどの別名でも知られており、細胞内病原体に対する自然免疫応答を引き起こすインフラマソームの重要な構成要素です。
• 本タンパク質はセンサーとして働き、細菌・真菌成分を間接的に認識するとNLRC4インフラマソーム複合体を形成し、カスパーゼ1の活性化、炎症性サイトカイン（例：IL-1β）の産生、マクロファージのピロトーシスを引き起こします。
• NLRC4はNAIPファミリータンパク質（NAIP1、NAIP2、NAIP5）と協働して機能します。NAIPファミリータンパク質はフラジェリン、T3SSロッドタンパク質（例：PrgJ）、T3SSニードルタンパク質などの病原体由来の特異的リガンドに直接結合し、これによりNLRC4インフラマソームの集合が誘発されます。
• NLRC4インフラマソームは、サルモネラ・チフィムリウム、赤痢菌、レジオネラ・ニューモフィラ、緑膿菌などのグラム陰性菌や、真菌病原体カンジダ・アルビカンスに対する宿主防御に不可欠です。
• 腸粘膜では、NLRC4は共生細菌と病原菌を区別し、サルモネラや緑膿菌などの病原菌に応答して特異的に防御的なIL-1β分泌を誘発します。
• 細胞内局在としては、NLRC4は細胞質に存在し、活性化に伴ってインフラマソームスペックを形成することができます。
• 組織発現：NLRC4は腸の単核食細胞で発現されており、粘膜免疫における役割が裏付けられています。
• 本タンパク質はC末端にロイシンリッチリピート（LRR）ドメイン、ATP結合活性を持つ中央のヌクレオチド結合ドメイン（NBD/NACHT）、N末端のCARDドメインを持ち、インフラマソーム活性化の過程でリン酸化を受けます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本ポリクローナル抗体の免疫原はマウスNLRC4のアミノ酸71～170番に対応しています。この領域はN末端ドメイン内に位置し、配列保存性からヒトおよびラットのオルソログと交差反応性を示す可能性があります。ご自身の実験系で交差反応性を検証してください。
• NLRC4の予測分子量は約116 kDaです。ウエスタンブロッティングでは、適切なゲル濃度と転写条件を使用し、NLRC4発現誘導のために刺激したマクロファージ細胞株（例：J774、RAW 264.7）などの陽性コントロールを含めてください。
• 免疫蛍光（IF）またはIF-Pアプリケーションでは、定常状態ではNLRC4は通常細胞質に存在しますが、刺激後に点状のインフラマソームスペックを形成することがあります。ASCまたはカスパーゼ1と共染色することで、活性化したインフラマソームを可視化できる可能性があります。
• ELISA用途では、本抗体は適切なペアリング検証後に捕捉抗体または検出試薬として使用できます。ご使用のアッセイ条件で滴定および試験を行ってください。

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