WB、IP、ELISA対応 抗NLRP3 ウサギモノクローナル抗体 - Q96P20

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：NLRP3の機能と局在

• NLRP3（NACHT、LRRおよびPYDドメイン含有タンパク質3）はクライオピリンとも呼ばれ、細胞質に存在するパターン認識受容体で、NLRP3インフラマソームのセンサー成分として機能します。 関連文献: PMID:16407889, PMID:18403674, PMID:18604214
• 病原体、結晶、環境粒子による活性化後、NLRP3はオリゴマー化してASCおよびプロカスパーゼ-1をリクルートし、インフラマソーム複合体を形成してカスパーゼ-1の活性化を促進します。これにより、炎症性サイトカインであるIL-1βとIL-18の切断・分泌、ならびにガスダーミンDを介したピロトーシスが引き起こされます。 関連文献: PMID:23582325, PMID:28847925, PMID:31189953
• NLRP3インフラマソームは、アラーミンHMGB1の非古典的分泌を誘導し、炎症反応を増幅させます。 関連文献: PMID:22801494
• 定常状態では、NLRP3はADP結合による自己阻害状態に保たれています。K+流出と膜の障害を誘発する多様な刺激が、コンフォメーション変化による活性化を引き起こします。 関連文献: PMID:35114687
• 活性化後、NLRP3は微小管形成中心（MTOC）に輸送され、NEK7によってロックが解除された後、ホスファチジルイノシトール4-リン酸（PtdIns4P）に結合することで分散型トランスゴルジネットワーク（dTGN）小胞に再局在し、活性型インフラマソームの集合が進行します。 関連文献: PMID:36442502, PMID:39173637
• インフラマソームとしての役割とは独立して、NLRP3はヘルパーT2（Th2）細胞内で転写調節因子として作用し、DNAに結合してIL-4の発現を促進することでTh2分化を誘導し、アレルギー性喘息や腫瘍増殖に関与することが知られています。
• 亜細胞レベルでは、NLRP3は細胞質、ミトコンドリア、小胞体、ゴルジ装置に局在し、分泌されることもあります。発現は主にマクロファージ、樹状細胞、上皮バリア細胞に認められ、単球や骨芽細胞では発現レベルが低いです。

実験ガイダンス・技術的なヒント

• 本抗体の免疫原は、ヒトNLRP3のN末端側PYDドメイン付近のアミノ酸100～210番に対応しています。本抗体はこの領域のエピトープを認識する可能性があるため、切断型や変異型のコンストラクトを評価する際はご留意ください。
• ウエスタンブロットの場合、NLRP3の発現が知られているヒトマクロファージまたは末梢血単核球のライセートを用いて抗体の検証を行ってください。約118 kDaの位置にバンドが検出されることが予想されます。
• 免疫沈降実験では、標的のNLRP3はインフラマソーム内で複数のタンパク質と相互作用するため、NLRP3複合体の完全性を保つために最適化された溶解条件を使用してください。
• ELISA用途では、組換えNLRP3または細胞ライセートを用いた事前のチェッカーボード滴定により、最適なコーティング濃度および検出濃度を決定することを推奨します。
• NLRP3の活性化にはユビキチン化、リン酸化などの翻訳後修飾が関与する場合があるため、検出パターンの変化を観察するために、LPS + ニゲリシンなどの適切な刺激で細胞を処理することをご検討ください。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

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