ウエスタンブロット用 抗NNMT ウサギ PolymAb® - P40261

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景: NNMTの機能と局在

• NNMT (ニコチンアミド N-メチルトランスフェラーゼ) は、S-アデノシル-L-メチオニンを利用してニコチンアミドのN-メチル化を触媒し、N1-メチルニコチンアミドを生成する。この反応は、ニコチンアミド/ビタミンB3の主要な代謝経路である。 関連文献: PMID:21823666, PMID:23455543, PMID:8182091
• NNMTはS-アデノシル-L-メチオニンを消費することにより、細胞のメチル化ポテンシャルを調節し、H3K27me3などの抑制性ヒストンマークの全体的な低メチル化をもたらす。この活性は、広範なエピジェネティックおよび転写変化を媒介する。 関連文献: PMID:23455543, PMID:26571212, PMID:31043742
• 発生過程において、NNMTは、着床前状態の多能性胚性幹細胞を特徴付ける抑制性ヒストン修飾の低レベル化に寄与する。 関連文献: PMID:26571212
• NNMTはまた、白色脂肪組織（エネルギー消費とポリアミン流束）および肝臓（糖新生とコレステロール生合成）における代謝調節因子としても機能する。その生成物であるN1-メチルニコチンアミドは、SIRT1脱アセチル化酵素を安定化し、タンパク質のアセチル化を調節することができる。
• 本酵素は、ニコチンアミドと構造的に類似した他のピリジン類をN-メチル化することができ、異物解毒への関与が示唆されている。 関連文献: PMID:30044909
• NNMTは主に肝臓で発現し、腎臓、肺、骨格筋、胎盤、心臓では低レベルで発現する。脳や膵臓では検出されない。
• 本タンパク質は細胞質に局在し、メチル基供与体としてS-アデノシル-L-メチオニンを利用するメチルトランスフェラーゼファミリーに属する。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトNNMT全長のアミノ酸1-264をカバーしており、広いエピトープ認識領域を提供する。断片化やドメインマッピング実験を設計する際は、この点を考慮すること。
• ウエスタンブロット (WB) では、約30kDa付近にバンドが期待される。適切なサンプル系で検証し、最適な検出のために適切な変性および還元条件を使用すること。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学 (IF/ICC) では、標的細胞種に基づいて細胞質局在を保持する固定および透過処理プロトコルを最適化することを推奨する。
• 免疫沈降 (IP) アッセイでは、ウサギモノクローナル抗体フォーマットにより高い特異性が保証され、標準的なIPプロトコルとの互換性がある。
• ELISAでは、本抗体は直接法および捕捉法の両方で利用可能である。最適なS/N比を確立するために、抗体濃度の滴定を検討すること。
• ヒト、マウス、ラットのNNMTとの交差反応性が確認されている。他の種については、事前に配列相同性を確認すること。

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