ウエスタンブロット、IF/ICC、IF-P、ELISA用 抗nNOS ウサギモノクローナル抗体 - P29475

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：nNOSの機能と局在

• nNOS（一酸化窒素合成酵素1）は、主に神経系において神経伝達物質および逆行性メッセンジャーとして機能する一酸化窒素（NO）の産生を担う構成的酵素です。
• 神経シグナル伝達以外に、nNOSはペプチジルシステインS-ニトロシラーゼ活性を示し、SRRなどの細胞質標的タンパク質のシステインS-ニトロシル化を媒介し、翻訳後調節に寄与します。
• NOS1遺伝子によってコードされ、選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生じます。アイソフォーム1は広く発現（脳、骨格筋、精巣、肺、腎臓）し、アイソフォーム3は精巣特異的、アイソフォーム4は精巣、骨格筋、肺、腎臓で検出されます。
• 細胞内局在としては、nNOSは細胞膜（筋細胞では筋形質膜を含む）および神経細胞の樹状突起スパインに局在し、精密なシグナル伝達に適した位置を占めています。
• 本タンパク質はヘム含有フラボタンパク質であり、カルモジュリン、FAD、FMN、NADPH、鉄を結合し、その酸化還元酵素活性には複数の補因子が必要です。
• 翻訳後修飾には、その活性、安定性、または局在を調節する可能性のあるリン酸化およびユビキチン化が含まれます。
• 一酸化窒素シグナル伝達の鍵酵素として、nNOSは神経伝達、シナプス可塑性、筋収縮性に関与しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はC末端ペプチド（aa 1335–1434）に対応しており、この領域はヒト、マウス、ラット間で保存されており、報告されている交差反応性と一致します。他の種で使用する場合は、配列アライメントを考慮してください。
• ウエスタンブロット（WB）では、nNOSの高分子量（〜161 kDa）により、転写時間の延長やゲル濃度の最適化が必要になる場合があります。関連する組織または細胞溶解物での検出を検証してください。
• 免疫蛍光（IF）アプリケーションでは、細胞膜、筋形質膜、または樹状突起スパインでの染色を予想してください。コンパートメント特異的マーカーとの共染色は局在の確認に役立ちます。
• ELISAでは、標準的なペプチドまたはタンパク質ベースのプロトコルが適用可能です。非特異的シグナルが懸念される場合は、組換えnNOSまたは競合ペプチドブロッキングアッセイを使用して特異性を確認してください。
• ウサギモノクローナル抗体として、ロット間の高い一貫性を提供します。それでも、新しいロットごとに、意図したアッセイシステムで力価を決定する必要があります。

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