WB、IF-P、ELISA用抗NOXA2/p67phoxポリクローナル抗体 - P19878

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：NOXA2/p67phox（NCF2）の機能と局在

• 好中球細胞質因子2（NCF2）は、NOXA2、p67-phox、p67-PHOX、67 kDa好中球オキシダーゼ因子としても知られ、食細胞NADPHオキシダーゼ複合体の細胞質サブユニットです。
• NCF2は、活性化されたNADPHオキシダーゼ複合体内でNADPHからO2への電子移動を媒介することにより、スーパーオキシドアニオン（O2(-)）の産生に必須です（PubMed:12207919、PubMed:38355798）。 関連文献： PMID:12207919、PMID:38355798
• NADPHオキシダーゼ複合体の活性化は、リン酸化依存的に細胞質NCF1/p47-phoxサブユニットがCYBA/p22-phoxに結合することで開始され、細胞膜またはファゴソーム膜での複合体形成が促進されます。
• このタンパク質は細胞質に局在し、活性化されると膜へ移行します。
• NCF2はリン酸化タンパク質であり、オキシダーゼ複合体内のタンパク質間相互作用を媒介するTPRリピートおよびSH3ドメインを含みます。
• NCF2の変異は、スーパーオキシド産生の異常を特徴とする原発性免疫不全症である慢性肉芽腫症と関連しています。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生じ、主要アイソフォームの分子量は約60 kDaです。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 使用されている免疫原は、ヒトNCF2（NP_000424.2）のアミノ酸227～526をカバーする組換え融合タンパク質です。ポリクローナル抗体であるため、複数のエピトープを認識する可能性があり、アイソフォームまたはオルソログと交差反応する可能性があります。
• ウエスタンブロット（WB）では、約60 kDaの標的バンドが予想されます。明瞭に検出するため、ライセート調製および抗体希釈倍率の最適化を検討してください。適切な陽性対照および陰性対照を用いて検証してください。
• 免疫蛍光法（IF-P）では、細胞質および膜へ移行したNCF2を検出できるよう、適切な固定および透過処理を行ってください。関連する細胞株または初代細胞を使用してください。
• ELISAでは、目的とする感度および特異性を達成するため、最適なコーティング抗原および抗体滴定条件を決定してください。
• マウスとの交差反応性が報告されています。ヒト以外のモデルに使用する場合は、使用する特定のサンプル系で検証してください。

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