WB、IF/ICC、ELISA用抗NPAS2ウサギポリクローナル抗体 - Q99743

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：NPAS2の機能と局在

• NPAS2（neuronal PAS domain-containing protein 2）は、MOP4、bHLHe9、PASD4としても知られ、概日時計の中核構成要素を形成するbasic-helix-loop-helix-PAS転写因子です。分子時計のフィードバックループの正の調節系において、転写活性化因子として機能します。
• このタンパク質はBMAL1（またはBMAL2）とヘテロ二量体を形成し、時計制御遺伝子のプロモーター上にあるE-boxエレメント（5'-CACGTG-3'）に結合します。これにより、時計中核抑制因子（PER1/2/3、CRY1/2）や、代謝、睡眠、その他の生理プロセスに関与する下流標的遺伝子のリズミカルな転写を促進します。
• NPAS2は、通常の明暗条件および摂食条件下で概日行動を維持するうえで重要な役割を果たし、予定された食物供給と摂食行動の同期にも関与します。また、脳内のGABARA1受容体発現を日周的に調節することで、睡眠恒常性や不安様行動の制御にも寄与します。
• NPAS2は中枢時計以外にも、肝臓などの末梢組織における遺伝子転写を調節し、主要な代謝経路を制御します。また、細胞周期およびDNA修復遺伝子を調節することで、DNA損傷応答にも関与します。
• NPAS2-BMAL1ヘテロ二量体は、核内受容体NR1D1/2およびRORA/B/Gを活性化する二次フィードバックループに関与します。これらの核内受容体は、それぞれBMAL1の転写を抑制および活性化し、概日リズムの頑健性に寄与します。
• 細胞内では、転写因子としての役割と一致して、NPAS2は核に局在します。ヘム結合PASドメインを含み、ヘム結合がその活性に影響を及ぼす可能性があります。
• 翻訳後修飾およびタンパク質間相互作用は概日周期の決定に重要であり、NPAS2を介したリズムの破綻は、心血管疾患、がん、メタボリックシンドローム、老化に関与すると考えられています。
• このタンパク質は全身に広く発現しており、脳の視交叉上核（SCN、中央時計）および末梢振動体で特に重要な役割を果たします。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• このウサギポリクローナル抗体の免疫原は、ヒトNPAS2（NP_002509.2）のアミノ酸45～240内の配列に対応しており、N末端bHLHドメインの一部と最初のPASドメインを含む領域です。この設計により、天然型および変性型の両方に対する反応性が付与される可能性があります。
• ウェスタンブロッティングでは、約92 kDaのバンドが予想されます。還元条件および標準的なSDS-PAGEプロトコルの使用を検討してください。NPAS2は概日周期に伴って変動するため、最適な発現を捉えるにはサンプル採取時間を厳密に管理する必要があります。
• 免疫蛍光法／免疫細胞化学を行う場合、NPAS2は通常、核局在を示します。核内標的に適した固定および透過化条件を最適化し、核マーカーとの共染色によって特異性を確認できます。
• ELISAで使用する場合は、関連するサンプル系で抗体をバリデーションし、バックグラウンドを評価するための適切な対照を含めてください。ポリクローナル抗体はロット間で変動する可能性があるため、一貫したロット追跡を推奨します。
• マウスおよびラットNPAS2との交差反応性が報告されています。ただし、他の種での反応性を推定するには、免疫原領域の配列アラインメントを行うことが推奨されます。新しい種または用途ごとに、実験的なバリデーションが不可欠です。

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