WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗PARP1ポリクローナル抗体 - P09874

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：PARP1の機能と局在

• PARP1は標的タンパク質のポリADP-リボース化を触媒する核内酵素で、DNA修復、ゲノム維持、細胞死に中心的な役割を果たしています。 関連文献: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• DNA損傷センサーとして、PARP1は1本鎖および2本鎖切断に結合し、HPF1と共にヒストンやその他のクロマチンタンパク質のセリンADP-リボース化を触媒することで、クロマチンの脱凝縮と修復因子の動員を促進します。 関連文献: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:28190768, PMID:29954836
• PARP1はまた、NMNAT1との相互作用を介してグルタミン酸/アスパラギン酸のADP-リボース化を、HPF1と共にチロシンのADP-リボース化を媒介することができ、補因子依存的な残基特異性を示します。 関連文献: PMID:25043379, PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:30257210
• 修復機能に加え、PARP1は転写調節因子としても機能し、クロマチン構造の修飾による抑制因子として作用するほか、状況に応じて正または負の伸長因子として働きます。 関連文献: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• PARP1はプログラム細胞死経路に関与しています：全長タンパク質はパルタナトス（parthanatos）に関与し、カスパーゼ依存的な切断により生成される89kDa断片がAIFM1を介したアポトーシスを促進します。 関連文献: PMID:33168626
• 細胞内局在として、PARP1は主に核および核小体に局在しますが、特にDNA損傷やアポトーシス時には細胞質に移行したり、染色体に結合したりすることがあります。
• PARP1はDNA結合のための複数のジンクフィンガードメインと触媒ドメインを含み、その活性は自己ADP-リボース化、アセチル化、リン酸化をはじめとする翻訳後修飾によって調節されています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体の免疫原はC末端触媒ドメイン（アミノ酸662-1014）に対応しています。そのためWBでは、全長PARP1（約113 kDa）とカスパーゼにより切断されたC末端断片（約89 kDa）の両方を認識する可能性があります。アポトーシス研究では、適切な誘導剤を使用し、切断パターンを検証することを推奨します。
• IHC-Pでは主に核染色が予想されますが、細胞の状態や組織処理によっては細胞質または核小体にシグナルが検出されることがあります。必ず陽性対照（例：増殖細胞）と陰性対照を含めてください。
• IF/ICCの場合、PARP1はクロマチンに強く結合しているため、透過処理と固定プロトコルの最適化が必要です。Triton X-100による処理またはメタノール固定が有用な場合があります。
• ELISAでの使用には抗体の力価測定が必要となる場合があります。組換えタンパク質または細胞溶解物を抗原として使用できます。

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