ウエスタンブロットおよびELISA用 Anti-PCK1 モノクローナル抗体 (PEPCK-C) - P35558

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：PCK1の機能と局在

• PCK1（ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ1）はPEPCKの細胞質アイソフォームであり、糖新生の律速酵素として機能します。オキサロ酢酸の可逆的な脱炭酸とリン酸化を触媒し、クエン酸回路におけるカタプレロティックおよびアナプレロティックな流束を調節します。 関連参考文献： PMID:24863970, PMID:26971250, PMID:28216384

• 低グルコース条件下では、PCK1は糖新生のためにオキサロ酢酸からホスホエノールピルビン酸へのカタプレロティックな変換を駆動します。高グルコース条件下では、ホスホエノールピルビン酸からオキサロ酢酸へのアナプレロティックな変換を促進します。 関連参考文献： PMID:30193097

• 代謝機能に加えて、AKT1によるSer-90のリン酸化は、PCK1をセリン-タンパク質キナーゼへと切り替えます。このマルチタスキング（月下労働）キナーゼ活性は、小胞体への移行を引き起こし、そこでINSIG1/2をリン酸化してSREBP転写因子を放出し、脂質生成遺伝子の発現を活性化します。 関連参考文献： PMID:32322062

• PCK1は、ホスホエノールピルビン酸をグリコーゲンおよびペントースリン酸経路に供給することで、メモリーCD8+ T細胞の恒常性維持に寄与します（類似性による）。

• 細胞内局在に関して、PCK1は主に細胞質に存在しますが、AKTを介したリン酸化により小胞体へ移行します。

• 主要な組織発現部位は肝臓、腎臓、脂肪細胞であり、グルコースおよび脂質代謝における中心的な役割を反映しています。

• 翻訳後修飾にはアセチル化、ユビキチン化、リン酸化が含まれ、構造的にはPCK1はGTP結合キナーゼ、リアーゼ、脱炭酸酵素に分類されます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、Ser-90リン酸化部位から離れたC末端近くのアミノ酸523–622にまたがる合成ペプチドに対して作製されました。リン酸化特異的またはアイソフォーム特異的検出実験を設計する際は、この点を考慮してください。
• ウエスタンブロッティングでは、ヒト、マウス、またはラットの肝臓/腎臓ライセートでの検出を検証してください。これらの組織はPCK1を高発現しています。糖新生の誘導（例：絶食/cAMP処理）はシグナルを増強する可能性があります。
• ELISAでは、抗体のペアリングとサンドイッチ法フォーマットとの適合性をテストしてください。モノクローナルであるため、ロット間で一貫した特異性が保証されます。
• 予測分子量69 kDaを考慮し、適切なゲル分解能と転写条件を確保してください。翻訳後修飾により観察されるバンドがシフトする可能性があります。

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